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Immunoprecipitazione della cromatina (ChIP) di modificazioni istoniche da Saccharomyces cerevisiae
JoVE Journal
Genetica
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JoVE Journal Genetica
Chromatin Immunoprecipitation (ChIP) of Histone Modifications from Saccharomyces cerevisiae

Immunoprecipitazione della cromatina (ChIP) di modificazioni istoniche da Saccharomyces cerevisiae

DOI:

11:06 min

December 29, 2017

, , ,

Capitoli

  • 00:05Titolo
  • 00:52In Vivo Crosslinking of Proteins to DNA
  • 02:19Making Yeast Lysates
  • 04:08Immunoprecipitation (IP) of Modified Histones
  • 05:11Washing IPs, Eluting Histone-DNA Complexes and Reversing Protein-DNA Crosslinks
  • 07:24Quantitative PCR (qPCR) to Detect Enriched Genomic Regions
  • 08:46Results: ChIP Reveals Histone Modification Status at ant Genomic Region
  • 10:17Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Qui, descriviamo un protocollo per immunoprecipitazione della cromatina degli istoni modificati dal lievito Saccharomyces cerevisiae. DNA immunoprecipitato viene successivamente utilizzato per PCR quantitativa per interrogare l'abbondanza e la localizzazione di modifiche post-traduzionali degli istoni in tutto il genoma.

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