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JoVE Journal Immunologia e infezioni
A Facile Protocol to Generate Site-Specifically Acetylated Proteins in Escherichia Coli

Um protocolo Facile para gerar proteínas Site-Specifically acetiladas em Escherichia Coli

DOI:
10.3791/57061-v

•

11:08 min

•

December 09, 2017

•

, , , ,
1Department of Chemistry and Biochemistry,University of Arkansas, 2Cell and Molecular Biology Program,University of Arkansas, 3Department of Biological Sciences,University of Arkansas, 4Fayetteville High School

Capitoli

  • 00:00Titolo
  • 00:09Introduction
  • 01:03Protocol
  • 01:07Introducing the Stop Codon into the Target Gene
  • 02:58Expressing and Purifying Site-specifically Acetylated Protein
  • 06:21Biochemically Characterizing Acetylated Protein
  • 09:39Risultati
  • 10:37Summary

Summary

Traduzione automatica

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Expansão do código genético serve como uma ferramenta poderosa para estudar uma grande variedade de processos biológicos, incluindo acetilação de proteínas. Aqui vamos demonstrar um protocolo fácil de explorar esta técnica para gerar homogeneamente acetilado proteínas em locais específicos em células de Escherichia coli .

Tags

Site-specific AcetylationProtein AcetylationGenetic Code ExpansionPyrrolysyl-tRNA SynthetaseAmber Stop CodonE. Coli ExpressionSite-directed MutagenesisAcetyllysine Incorporation

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