Summary

الكى المضاعف في نموذج فأر من التهاب الفقار اللاصق

Published: October 27, 2023
doi:

Summary

تصف هذه الورقة بالتفصيل إجراءات العملية والاحتياطات الواجب اتخاذها أثناء الكى في علاج التهاب الفقار اللاصق في فئران التجارب.

Abstract

التهاب الفقار اللاصق (AS) هو شكل من أشكال التهاب المفاصل يزداد سوءا وتعطيلا يؤثر بشكل أساسي على الهيكل العظمي المحوري. هذا المرض يشمل أساسا العمود الفقري والمفصل العجزي الحرقفي. قد يحدث اندماج العمود الفقري والمفصل العجزي الحرقفي في المرحلة المتأخرة من المرض ، مما يؤدي إلى تصلب العمود الفقري وحداب ، وكذلك صعوبة في المشي ، مما يؤثر بشكل خطير على جودة العمل وأنشطة الحياة اليومية ويفرض عبئا ثقيلا على المريض والأسرة والمجتمع. تم إيلاء اهتمام متزايد للعلاج غير الدوائي كعلاج بديل ل AS. الكى هو تقنية علاجية قديمة تستخدم في الطب الصيني التقليدي (TCM). علاج الكى Du ، وهو علاج خارجي فريد ومبتكر تم تطويره على أساس الكى العادي ، له تأثير علاجي واضح على AS. يجمع Du-mokibustion بمهارة بين التقنيات المتوافقة للطب الصيني التقليدي لدمج خطوط الطول ونقاط الوخز والأدوية العشبية الصينية والكي. يصف هذا البحث إجراءات التشغيل والاحتياطات الواجب اتخاذها أثناء الكى المثاني في فئران التجارب بالتفصيل لتوفير أساس تجريبي لدراسة آلية الكى المثاني في علاج AS.

Introduction

التهاب الفقار اللاصق (AS) هو شكل من أشكال التهاب المفاصل يزداد سوءا وتعطيلا يؤثر بشكل أساسي على الهيكل العظمي المحوري. وفقا لأحدث مسح وبائي ، ~ 0.01٪ -1.8٪ من الناس في العالم يعانون من هذه الحالة1 ، معظمهم من الشباب الذكور (نسبة الذكور إلى الإناث هي ~ 2-3: 1) 2. معدل حدوث AS في السكان الصينيين هو 0.2 ٪ -0.4 ٪. هذا المرض يشمل أساسا العمود الفقري والمفصل العجزي الحرقفي. قد يحدث اندماج العمود الفقري والمفصل العجزي الحرقفي في المراحل المتأخرة من المرض ، مما يؤدي إلى تصلب العمود الفقري وحداب ، وكذلك صعوبة في المشي ، مما يؤثر بشكل خطير على جودة العمل وأنشطة الحياة اليومية ويفرض عبئا ثقيلا على المريض والأسرة والمجتمع1. حاليا ، لا يوجد حل نهائي ل AS ، وتركز العلاجات المقدمة ، الدوائية وغير الدوائية ، في المقام الأول على تخفيف الألم ، وإبطاء تطور المرض ، وتحسين نوعية الحياة. في السنوات الأخيرة ، نظرا لأن خيارات العلاج الدوائي كانت محدودة للغاية3 ، فقد تم إيلاء اهتمام متزايد للعلاج غير الدوائي ، والذي أصبح علاجا بديلا ل AS. في الصين ، غالبا ما يفضل المرضى العلاج الخارجي الذي يتكون من الطب الصيني التقليدي (TCM) ، والذي له آثار جانبية طفيفة وراحة كبيرة أثناء العلاج.

الكى هو تقنية علاجية قديمة تستخدم في الطب الصيني التقليدي. الكى المدو هو تقنية علاج خارجية تتكون من “الكى الطبي بالرغوة” على الجزء الفقري من خط الطول Du. يستخدم بشكل رئيسي في علاج AS وقد أظهر السلامة والفعالية. بالمقارنة مع الكى العادي ، يتميز Du-moxibustion بخصائص منطقة الكى الواسعة ، ومخروط moxa الكبير ، وقوة النيران القوية ، ودرجة الحرارةالعالية 4. تشير المراجعة المنهجية والتحليل التلوي إلى أن الكى هو علاج تكميلي فعال ل AS5. أكدت دراسة حديثة أن الأعراض السريرية وبعض العوامل الالتهابية لمرضى AS قد تحسنت بسبب الكى6. كشفت الدراسات أن الكى Du يمكن أن يزيد من محتوى الدماغ من β-endorphin ويمارس تأثيرا مسكنا مركزيا7 ، ويقلل من تنظيم التعبير عن جين HLA-B27 8 ، ويؤخر معدل تكرار AS. كما أن الكى المتساوي له تأثير محسن على تطور AS عن طريق تقليل مؤشر الالتهاب ESR (ESR) ومستويات البروتين التفاعلي C (CRP) ، والببتيد C-terminal من الكولاجين من النوع الأول (CTX-I) ، وبروتين Dickkopf1 (DKK1) 9,10.

أظهرت دراسة سريرية أخرى أن الكى Du يمكن أن يزيد من ضبط المجموعات الفرعية للخلايا التائية المضطربة ، Ig ، ويكمل C3 لتحقيق التوازن بين آلية المناعة11. من حيث استقلاب العظام ، يمكن أن يمنع الكى صعود الفوسفاتيز القلوي في الدم (ALP) وفوسفور المصل (S-P) ، ويزيد من الكالسيوم في الدم (S-Ca) ، وكثافة المعادن في العظام (BMD) ، وقوة العظام12. علاوة على ذلك ، يمكن ل Du-mokibustion إصلاح وظيفة العمود الفقري في نقاط متعددة لتخفيف أعراض التعب لدى مرضى AS13. كشفت بعض الدراسات التي أجريت على عن الآلية المحتملة للكي في علاج AS. أشارت دراسة إلى أن الكى حسن بشكل كبير الحالة الصحية العامة ، وقلل من مستويات سمك المخلب ، وقلل من مستويات IL-1β و PGE2 و IL-6 و TNF-α في عينات أنسجة الأربطة في العمود الفقري. ربط تحليل المسار الأيضي المستقلبات المحددة بدورة TCA ، وكذلك الدهون والأحماض الأمينية والنباتات المعوية واستقلاب البيورين14. أظهرت دراسة أخرى أن الكى قمع التعبير عن السيتوكينات المؤيدة للالتهابات ، IL-1β ، TNF-α ، IL-17 ، و IL-6. خفض مستويات mRNA من RANKL و RANK و ALP و OCN ؛ وتحسين السمات النسيجية المرضية في الفئرانAS 15.

في حين أن هذه الدراسات تشير إلى أن الكى قد يكون فعالا في علاج AS، هناك حاجة إلى مزيد من البحوث لتأكيد هذه النتائج وتحديد بروتوكول العلاج الأمثل للكي في المرضى الذين يعانون من AS. قام فريقنا بإنشاء وتعديل علاج الكى بناء على النظرية الأساسية والتشغيل العملي للكي الصيني التقليدي ، والذي تم تنفيذه وتطبيقه على نطاق واسع في الممارسة السريرية الصينية لأكثر من 35 عاما. على الرغم من وجود عدد قليل من الدراسات عالية الجودة حول علاج AS بواسطة Du-moxibustion ، إلا أن دلالته في علاج AS مدعومة بالأدلة. ومع ذلك ، فإن آلية علاج AS مع Du-mokibustion تستحق مزيدا من الدراسة. تعد الدراسة على طريقة مهمة لاستكشاف آلية الكى في علاج AS. العملية السريرية ل Du-mokibustion ناضجة نسبيا ولكنها نادرا ما تستخدم في دراسة الآلية في التجارب على. تصف هذه الورقة بالتفصيل العملية والاحتياطات الواجب اتخاذها أثناء الكى Du في علاج فئران التجارب AS.

Protocol

تمت الموافقة على جميع التجارب على من قبل لجنة مراجعة أخلاقيات رعاية التجريبي بجامعة شاندونغ للطب الصيني التقليدي (No. SDUTCM20230831301). 1. إعداد تحديد المجموعات التجريبية وعدد لكل مجموعة مقدما. اختر ذكور الفئران BALb / c ، وقم بإيوائها في درجة حرارة ثابتة تبلغ 22 ± 1 د…

Representative Results

طورت الفئران النموذجية التي يسببها PG أعراض التهاب المفاصل المحيطي ، والتي تتميز باحمرار وتورم الأطراف وأصابع القدم ، وطورت تدريجيا التهاب المفاصل المحوري في وقت مبكر من الأسبوع 14 ، وهو مشابه جدا لمظهر AS. لذلك ، اعتبر نموذج الماوس AS ناجحا إذا كان مؤشر التهاب المفاصل (الذكاء الاصطناعي) أكثر …

Discussion

يتجلى AS سريريا كألم تورم في الظهر وأسفل الظهر والمفاصل ، وقد يحدث تشوه في العمود الفقري وصلابة المفاصل في الحالات الشديدة26. يمكن أن يؤدي التشخيص والعلاج المبكر إلى تحسين نوعية الحياة وتقليل معدلات الإعاقة وتحسين توقعات المرضى الذين يعانون من AS. وفقا للطب الصيني التقليدي (TCM) ،…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

تم دعم هذا العمل من قبل البرنامج العام للمؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم 82174491) ومشروع الميراث الأكاديمي لمدرسة تشيلو للطب الصيني التقليدي (No. لو ويهان [2020]132). شكرا لمركز المختبر بجامعة شاندونغ للطب الصيني التقليدي لتزويدنا بالظروف التجريبية.

Materials

10% EDTA Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd.,Shanghai, China
alcohol pads HYNAUT, Qingdao Hainuo Biological Engineering Co., LTD, Qingdao, China
anesthesia machine Medical Supplies & Services INT. LTD, Keighley, UK
centrifuge tubes Axygen, Corning, NewYork, UAS
complete Frech's adjuvant (CFA) aladdin,Shanghai, China F393378
cotton ball Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China
cotton gauze Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China
cutting board self-preparation
decorin from bovine articular cartilage Sigma-Aldrich, MO, USA D8428
depilatory cream Veet, Reckitt Benckiser (China) Investment Co. LTD, Shanghai, China
electronic scale Shanghai Yajin Electronic Technology Co., Ltd.,Shanghai, China
Eppendorf tube Axygen, Corning, NewYork, UAS
eye lubricant Beijing Shuangji Pharmaceutical Co., LTD., Beijing, China
ginger self-preparation
GraphPad Prism 7 software GraphPad Software,Boston, USA
hair clipper Super human Group CO LTD, Jinhua, China
heating pads Shenzhen Leshuo Tech Co., Ltd.,Shenzhen, China
incomplete Freund’s adjuvant (IFA) aladdin,Shanghai, China F393371
injection syringe Shandong Xinhua Ande Medical Supplies Co., LTD, Zibo, China
isoflurane Shenzhen Rayward Life Technology Co., LTD, Shenzhen, China R510-22-10
joss stick Shijiazhuang Lidu Fragrant Industry Co., LTD.,Shijiazhuang, China
juicer Braun (Shanghai) Co., Ltd.,Shanghai, China
knife self-preparation
lighter Zhejiang tiger-lighter Co. LTD
mortar Luoyang Yinai Ceramic Technology Co., LTD.,Luoyang, China
Mouse IL-17 ELISA Kit absin, Shanghai, China abs520009-96T
Mouse TNF-α ELISA Kit Wuhan Sanying, Wuhan, China KE10002
mulberry paper Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China
OFT Xinruan,Shanghai, China XR-XZ301
paper cup self-preparation
pipettes OXFORD BIO INSTRUMENTS INC.,Oxford, UK
refined moxa velvet self-preparation
rotarod Xinruan,Shanghai, China XR-6C
scientz-48L cryogenic high throughput tissue grinder Ningbo Xinzhi Biotechnology Co., LTD
scissors Shandong Jiaren Medical Supplies Co., Ltd., Zibo, China
semi-automatic paraffin sectioning machine Leica Camera AG, Watznach, Germany
SPSS 25.0 software International Business Machines Corporation, NewYork, UAS
TCM powder self-preparation
tips Biosharp, Labgic, Beijing, China
writing brush Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China

Riferimenti

  1. Sieper, J., Poddubnyy, D. Axial spondyloarthritis. Lancet. 390 (10089), 73-84 (2017).
  2. Lee, W., Reveille, J. D., Weisman, M. H. Women with ankylosing spondylitis: a review. Arthritis Rheum. 59 (3), 449-454 (2008).
  3. Sari, &. #. 3. 0. 4. ;., Öztürk, M. A., Akkoç, N. N. of ankylosing spondylitis. Turk J Med Sci. 45 (2), 416-430 (2015).
  4. Zhang, L., et al. Governor vessel moxibustion: Ancient Chinese medical technology with new vitality. Chin J Integr Med. 23 (5), 396-400 (2017).
  5. Hu, J., et al. Moxibustion for the treatment of ankylosing spondylitis: a systematic review and meta-analysis. Ann Palliat Med. 9 (3), 709-720 (2020).
  6. Liu, Y., Wang, P., Sun, Y. Y., Qu, J., Li, M. Efficacy of thunder-fire moxibustion in treating ankylosing spondylitis of kidney deficiency and governor meridian cold and its influence on TNF-α and RANKL: study protocol for a prospective, nonblinded, single-center, randomized controlled trial. Trials. 23 (1), 344 (2022).
  7. Chong, G. Q., Ma, Y., Sun, H. S., Zhang, T., Peng, W. Study on clinical and analgesic mechanism of moxibustion in the treatment of ankylosing spondylitis. J Clin Acupunct Moxib. (06), 48-49 (1999).
  8. Liu, W. Q., Lu, X. H. Clinical observation of Melilotus extract tablets combined with Dujiu for treating ankylosing spondylitis. Pharm Res. 35 (03), 182-184 (2016).
  9. Zhang, Y. L., Lin, J. H., Zhou, Y. Y., Zhao, G. Q., He, Y. T. Clinical observation of Bushen Qiangdu Zhilou decoction combined Du-moxibustion in treating ankylosing spondylitis. Chin J Exp Tradit Med Formulae. 21 (10), 190-194 (2015).
  10. Guo, L. J., et al. Clinical effect of moxibustion at governor vessel combined with Bushen Quhan Huashi prescription for ankylosing spondylitis and its effect on levels of CTX-I and DKK1 in serum. New Chin Med. 53 (10), 117-121 (2021).
  11. Deng, Y. X. Governor moxibustion treatment of ankylosing spondylitis the adjustment of the T-cell subsets observed. J Practical Tradi Chin Inter Med. 26 (18), 77-78 (2012).
  12. Wang, Y. Q. Mechanism of exercise combined with moxibustion in the treatment of osteoporosis in castrated rats. Chin J Gerontol. 37 (04), 839-840 (2017).
  13. Ren, J. Y., Li, F., Yan, J., Wan, C., Cai, L. Clinical study of Du-moxibustion combined with needling Huatuo Jiaji acupoint in the treatment of AS of kidney-Yang deficiency. J Clin Acupunct Moxib. 35 (06), 41-44 (2019).
  14. Xu, X., et al. Metabolomic analysis of biochemical changes in the tissue and urine of proteoglycan-induced spondylitis in mice after treatment with moxibustion. Integr Med Res. 10 (1), 100428 (2021).
  15. Xu, X., et al. Moxibustion attenuates inflammation and alleviates axial spondyloarthritis in mice: Possible role of APOE in the inhibition of the Wnt pathway. J Tradit Complement Med. 12 (5), 518-528 (2022).
  16. Li, X., et al. Inflammation intensity-dependent expression of osteoinductive wnt proteins is critical for ectopic new bone formation in ankylosing spondylitis. Arthritis Rheum. 70, 1056-1070 (2018).
  17. Cui, H., et al. CXCL12/CXCR4-Rac1-mediated migration of osteogenic precursor cells contributes to pathological new bone formation in ankylosing spondylitis. Sci Adv. 8 (14), eabl8054 (2022).
  18. Braem, K., Lories, R. J. Insights into the pathophysiology of ankylosing spondylitis: contributions from animal models. Joint Bone Spine. 79 (3), 243-248 (2012).
  19. Mikecz, K., Glant, T. T., Poole, A. R. Immunity to cartilage proteoglycans in BALB/c mice with progressive polyarthritis and ankylosing spondylitis induced by injection of human cartilage proteoglycan. Arthritis Rheum. 30, 306-318 (1987).
  20. Li, Z., et al. Tenascin-C-mediated suppression of extracellular matrix adhesion force promotes entheseal new bone formation through activation of Hippo signalling in ankylosing spondylitis. Ann Rheum Dis. 80 (7), 891-902 (2021).
  21. Glant, T. T., Cs-Szabo´, G., Nagase, H., Jacobs, J. J., Mikecz, K. Progressive polyarthritis induced in BALB/c mice by aggrecan from human osteoarthritis cartilage. Arthritis Rheum. 41, 1007-1018 (1998).
  22. Hu, B., Li, Y., Tan, J. Research progress of moxibustion in the treatment of ankylosing spondylitis. Rheum & Arthritis. 11 (05), 77-80 (2022).
  23. Yang, Y., Dong, Q., Li, R. Matrine induces the apoptosis of fibroblast-like synoviocytes derived from rats with collagen-induced arthritis by suppressing the activation of the JAK/STAT signaling pathway. Int J Mol Med. 39 (2), 307-316 (2017).
  24. Shiotsuki, H., et al. A rotarod test for evaluation of motor skill learning. J Neurosci Methods. 189 (2), 180-185 (2010).
  25. Liu, P., et al. A mouse model of ankle-subtalar joint complex instability induced post-traumatic osteoarthritis. J Orthop Surg Res. 16 (1), 541 (2021).
  26. Taurog, J. D., Chhabra, A., Colbert, R. A. Ankylosing spondylitis and axial spondyloarthritis. N. Engl. J. Med. 374, 2563-2574 (2016).
  27. Schett, G., et al. Enthesitis: From pathophysiology to treatment. Nat. Rev. Rheumatol. 13, 731-741 (2017).
  28. Duan, W. X., et al. Effect of different concentrations of Moxa-smoke on lung function and TNF-α and IL-1 β levels in serum and lung tissues in normal rats. Zhen Ci Yan Jiu [Acupuncture Research]. 43 (2), 98-103 (2018).
  29. Callhoff, J., Sieper, J., Weiß, A., Zink, A., Listing, J. Efficacy of TNFα blockers in patients with ankylosing spondylitis and non-radiographic axial spondyloarthritis: a meta-analysis. Ann Rheum Dis. 74 (6), 1241-1248 (2015).
  30. Schinocca, C., et al. Role of the IL-23/IL-17 pathway in rheumatic diseases: an overview. Front Immunol. 12, 637829 (2021).
  31. Gravallese, E. M., Schett, G. Effects of the IL-23-IL-17 pathway on bone in spondyloarthritis. Nat Rev Rheumatol. 14 (11), 631-640 (2018).
  32. Kenna, T. J., et al. Enrichment of circulating interleukin-17-secreting interleukin-23 receptor-positive γ/δ T cells in patients with active ankylosing spondylitis. Arthritis Rheum. 64 (5), 1420-1429 (2012).
  33. Poddubnyy, D., Sieper, J. Treatment of axial spondyloarthritis: what does the future hold. Curr Rheumatol Rep. 22 (9), 47 (2020).
  34. van der, H. D., et al. Ixekizumab, an interleukin-17A antagonist in the treatment of ankylosing spondylitis or radiographic axial spondyloarthritis in patients previously untreated with biological disease-modifying anti-rheumatic drugs (COAST-V): 16 week results of a phase 3 randomised, double-blind, active-controlled and placebo-controlled. Lancet. 392 (10163), 2441-2451 (2018).
  35. Fu, Y. S., et al. Pharmacological properties and underlying mechanisms of curcumin and prospects in medicinal potential. Biomed Pharmacother. 141, 111888 (2021).
  36. Hassan, A. S., Hofni, A., Abourehab, M. A. S., Abdel-Rahman, I. A. M. Ginger extract-loaded transethosomes for effective transdermal permeation and anti-inflammation in rat model. Int J Nanomedicine. 18, 1259-1280 (2023).

Play Video

Citazione di questo articolo
Yu, W., Li, X., Jia, Z., Hou, Y., Dong, T., Wang, X., Liu, Y., Yang, J. Du-Moxibustion in a Mouse Model of Ankylosing Spondylitis. J. Vis. Exp. (200), e65586, doi:10.3791/65586 (2023).

View Video