Minderjarige werknemers van de mier soorten Colobopsis explodens worden ontleed om te isoleren van de inhoud van de wasachtige opgeslagen in hun hypertrophied mandibulaire klier reservoirs voor latere oplosmiddel-extractie en analyse met gaschromatografie-massaspectrometrie. De aantekening en de identificatie van vluchtige bestanddelen met behulp van de open-source software MetaboliteDetector wordt ook beschreven.
Het doel van dit manuscript is te presenteren een protocol met een beschrijving van de metabolomic analyse van de Borneose ‘exploderende mieren’ behoren tot de groep Colobopsis bloedgras (COCY). Voor dit doel is het model soorten C. explodens gebruikt. Mieren, die behoren tot de kaste van de minderjarige werknemer bezitten onderscheidend hypertrophied mandibulaire klieren (MGs). In het gevecht van de territoriale gebruiken ze de viskeuze inhoud van hun uitgebreide mandibulaire klier reservoirs (MGRs) te doden van rivaliserende geleedpotigen in karakteristiek suïcidale ‘explosies’ door vrijwillige breuk van het gastral integument (autothysis). Wij tonen de dissectie van werkmieren van deze soort voor de isolatie van het gastral gedeelte van de wasachtige MGR inhoud, alsmede de vermelding van de nodige stappen die nodig zijn voor oplosmiddel-extractie van de daarin staande vluchtige stoffen met latere gas chromatografie-massaspectrometrie (GC-MS) analyse en vermeende identificatie van metabolieten die zijn opgenomen in het extract. De dissectie-procedure is uitgevoerd in gekoelde omstandigheden en zonder het gebruik van een bufferoplossing dissectie om te minimaliseren van de veranderingen in de chemische samenstelling van de inhoud van de MGR. Na een extractie van vluchtige metabolieten die erin zijn opgenomen, op basis van oplosmiddelen, worden de nodige maatregelen voor het analyseren van de monsters via vloeistof-injectie-GC-MS gepresenteerd. Tot slot, gegevensverwerking en vermeende metaboliet identificatie met het gebruik van de open-source software MetaboliteDetector wordt weergegeven. Met deze aanpak, de profilering en identificatie van vluchtige metabolieten in MGRs van mieren, die behoren tot de COCY group via GC-MS en de software van de MetaboliteDetector mogelijk.
Het algemene doel van de workflow die hier gepresenteerd is het algemene onderzoek van chemische samenstelling in secreties van insecten. Dit wordt gedaan met het primaire doel van het ophelderen van de ecologische functies van de afscheiding als geheel, of van interne verbindingen daarvan. Bovendien zijn we geïnteresseerd in onderzoek naar de metabole routes die ten grondslag liggen aan de verbindingen die zijn gevonden in de respectieve afscheidingen. Vooral klier inhoud van mieren (Hymenoptera (Vliesvleugeligen), Formicidae) hebben stijgende belangstelling in de afgelopen jaren opgedaan, omdat zij bronnen van tot nog toe onontgonnen potentieel bioactieve stoffen (lijm, antimicrobiële middelen, enz.)1, 2. kleine werkmieren van sommige soorten die behoren tot de COCY groep3,4 kunnen dergelijke verbindingen opgenomen in hun hypertrophied MGRs die uit te van de monddelen aan de gaster5,6 breiden. Wanneer bedreigd door vermeende vijanden, minderjarige werknemers van C. explodens7 en enkele verwante soorten kunnen maken gebruik van hun MGR inhoud op een ongebruikelijke manier: ze offeren zich door het bezwijken van hun gastral muur om uit te werpen de kleverige inhoud van de MGRs explosief op de tegenstander, sterven waarna de vermeende vijand wordt vastgehouden en kan zelfs5,6,8,9. Het doel van de ontwikkeling en het gebruik van de hierin gepresenteerde methoden moest helpen bij het verbeteren van het inzicht in de chemische samenstelling en de aard van voorlopig giftige bestanddelen van deze mier-secretie.
Te dien einde presenteren we een protocol voor de dissectie van C. explodens Arbeider mieren te verkrijgen van het gastral gedeelte van de inhoud ervan van wasachtige, MGR met latere oplosmiddel-extractie en analyse door GC-MS.
GC-MS-analyse is een van de gevestigde methoden voor de profilering en identificatie van vluchtige metabolieten (volatilome) van insecten. Typische analyten belangstelling voor mieren omvatten cuticular koolwaterstoffen10, semiochemicals11, en in het algemeen, verbindingen met biologische activiteit12. Monsters kunnen worden verkregen van hele dieren of van lichaamsdelen en vloeistoffen geïsoleerd via dissectie van de insecten13,14. Monster voorbereiding technieken omvatten extractie van de daarin staande metabolieten met het gebruik van oplosmiddelen14 of15(HS-SPME) headspace-solid-fase-microextraction.
Voor metabolomic studies is het essentieel dat de monsters direct na de monsterneming, snel zijn bevroren om te minimaliseren van veranderingen in de chemische samenstelling en de hoeveelheid van de stoffen. De mieren gebruikt voor deze studie werden gedood door snelle bevriezen ter plaatse in een koel zak gevuld met diepgevroren cold packs. De monsters werden vervolgens opgeslagen in een vriezer van-20 ° C met behulp van de generator-aangedreven elektriciteit, voordat ze werden vervoerd naar het laboratorium op droog ijs. De hier gepresenteerde dissectie-procedure biedt de mogelijkheid om het isoleren van MGR inhoud zonder het analyseren van de hele mier of de gaster als geheel, als het is al eerder gedaan voor verschillende COCY soorten16,17,18. Bovendien, het voorgestelde protocol kunt ook directe toegang en analyse van de omliggende klieren en weefsels, zoals de venom klier (VG)5,8, van de Dufour klier (DG)8of de darmen in andere biologische studies of naar controleren op mogelijke Kruis-besmettingen geïntroduceerd tijdens de behandeling of dissectie van de mieren. Om de veranderingen in de chemische samenstelling van de MGR-inhoud tijdens dissectie, ontdooien monsters of door het gebruik van chemische stoffen, is de dissectie-proces geoptimaliseerd om te worden uitgevoerd op een coldpack (-20 ° C), zonder het gebruik van eventuele extra buffers, wassen oplossingen, of oplosmiddelen. De monsters die zijn verkregen via deze methode zijn geschikt voor het beantwoorden van vragen van kwalitatieve en kwantitatieve.
Analyse van de gegevens met het oog op de vermeende metaboliet annotatie en identificatie gebeurt via de open-source software MetaboliteDetector19, die werd ontwikkeld voor de automatische analyse van GC-MS-gebaseerde metabolomica gegevens. Het detecteert enkele ion pieken aanwezig in chromatogrammen, voert een deconvolutie stap, en extracten van de deconvoluted massaspectra van chemische stoffen die zijn opgenomen in de geanalyseerde monsters. Vermeende identificatie van verbindingen met MetaboliteDetector is gebaseerd op de index van de vastberaden retentie (RI; de Kováts RI kan automatisch door de software worden berekend) alsmede de gelijkenis van de deconvoluted massaspectra. RI en spectrale matchfactor kunnen kruiscontrole tegen beide bestaande naslagbibliotheken (dat kan worden geïmporteerd, als ze in het gemeenschappelijke formaat van NIST), of tegen een vastgestelde interne bibliotheek. Dit is in overeenstemming met de richtsnoeren voor de (vermeende) samengestelde identificatie voorgesteld, bijvoorbeelddoor de chemische analyse Working Group (CAWG) van de metabolomica normen initiatief (MSI), waar een minimum van twee onafhankelijke en orthogonale gegevens ten opzichte van een authentiek compound (hier retentie tijd (RT) /RI en massaspectrum) geanalyseerd onder dezelfde proefomstandigheden worden voorgesteld als nodig is om niet-roman metaboliet identificaties20bevestigen.
Het volledige experiment is uitgevoerd op de inhoud van de MGR soorten model COCY C. explodens, maar de stappen van de dissectie kunnen ook worden aangepast aan het isoleren van de andere klieren aanwezig in de ant-gaster. Bovendien, terwijl presenteren we een protocol voor een totale analyse van de volatilome van de MGR-inhoud, de meer algemene onderdelen van de workflow met een beschrijving van extractie, GC-MS meting en evaluatie van de gegevens kan ook worden gebruikt voor analyse en (vermeende) identificatie van vluchtige metabolieten in het algemeen.
Aangezien de beschreven in dit manuscript experimenten worden uitgevoerd op insecten, is geen ethische goedkeuring vereist. Veldwerk, bemonstering van de mieren, evenals hun gebruik voor publicatie zijn in overeenstemming met de richtsnoeren voor het reguleren van dit project door de Universiti Brunei Darussalam, Brunei van onderzoek en innovatiecentrum en Brunei van Forestry Department, Brunei Darussalam.
In dit manuscript presenteren wij een volledige protocol voor het analyseren van de volatilome van de inhoud gevonden in het hypertrophied MGRs van C. explodens kleine werkmieren. Aangezien de mieren die hier gebruikt kunnen ‘ontploffen’ en hun MGR inhoud op een ongecontroleerde wijze bij aanraking met een tang uit te werpen, is het aanbevolen om het gebruik van een ‘zachte’ collectie techniek zoals geboden door een insect aspirator (Figuur 1). Voor sommige soorten van mier met inbegrip van COCY mieren, wellicht te beperken van het maximale aantal mieren aan vijf personen per 50 mL flacon, aangezien anders zelf vergiftiging van de mieren (bijvoorbeeld door de accumulatie van mierenzuur in de headspace) kan optreden. Voor de bevriezing van de mieren in het veld, kan een koel zak gevuld met diepgevroren cold packs worden gebruikt. De monsters moeten snel worden ingevroren en opgeslagen in gekoelde omstandigheden (bijvoorbeeld -20 ° C, beste bij-80 ° C), maar het wordt niet aanbevolen om te doden en de mieren slaan in vloeibare stikstof, aangezien grotere schade van hun klieren geconstateerd met deze methode.
De gepresenteerde buffer – en oplosmiddelvrije dissectie methodologie is geschikt voor het verkrijgen van de wasachtige mandibulaire klier reservoir inhoud, evenals andere klieren in bevroren werkmieren aanwezig. Voor volatilome analyse van de inhoud van de MGR van C. explodenszijn belangrijke aspecten moet worden beschouwd tijdens dissectie continue koeling van de mier (stap 2.1.4) en het minimaliseren van de Kruis-verontreinigingen van de MG monsters met andere klier inhoud/vloeistoffen aanwezig in de mier gaster (stap 2.5, Figuur 4en Figuur 15). Een aanzienlijk deel van de bevroren mieren kan worden beschadigd, hetzij omdat de mieren ” gedurende de bemonstering ontplofte of werden beschadigd tijdens het transport op droog ijs van de bemonstering-site naar het laboratorium. Als de regio gaster gebroken is, zijn deze mieren niet geschikt voor verdere analyse (figuur 2C, D). Indien slechts antennes en poten ontbreekt of gebroken zijn, kunnen deze mieren nog steeds worden gebruikt voor de extractie van de MGR inhoud en verdere analyse. Omdat de inhoud van de MGR van afgekoeld hebben C. explodens mieren een wax-achtige consistentie is rechttoe-rechtaan te isoleren hen met het gebruik van naalden van de dissectie (stap 2.5 figuur 3Een Figuur 14). Extra zorg moet worden genomen tijdens het verwerken van de kleverige MGR inhoud. Het kan vasthouden aan iets fysiek contact met het binnenkomt en ook vaak zal houden aan de verlostang dissectie, dat het risico van besmetting van andere monsters verhoogt. Er moet alleen het aanraken van de MGR-inhoud met de naald van de dissectie en onmiddellijk breng dit in de glazen flesjes gebruikt voor extractie (stappen 2.5 en 2.6). Bovendien, wordt het aanbevolen om het reinigen van de dissectie-apparatuur met een MeOH/H2O mengsel bij het schakelen tussen mieren of klier-types (stap 2.8).
Klier inhoud van andere soorten van de mier mag in een vloeibare staat zelfs tijdens het koelen met cold packs. In dit geval worden de hele klier met inbegrip van het membraan misschien eerst geïsoleerd en doorboord daarna om te verkrijgen van de inhoud. Vloeibare afscheidingen mogen ook worden verkregen met behulp van fijn capillaire pipetten. Met een gemiddelde lichaamslengte van ongeveer 4-5 mm (zonder antennes) behoren werknemers van C. explodens tot de kleinere soorten van de COCY groep. Hun vaak gezwollen gaster bestaat uit ongeveer 2-2,5 mm in lengte en 1-1,5 mm in de breedte. Werknemers van de zo ver grootste bekende soort van de COCY groep kunnen bereiken een grootte van ongeveer 8 mm in lengte met een gaster grootte van ongeveer 3 mm lang en 2,5 mm in de breedte. Aangezien het protocol is geschikt om te ontleden en het onderzoeken van individuele mieren en gasters van die grootte van verschillende COCY soorten, de hier gebruikte dissectie instrumenten en Microscoop wellicht worden aangepast gelden voor kleinere mieren of kleinere orgels. Bovendien is het aantal mieren per analysemonster wellicht ook worden verhoogd.
Terwijl de ontrafeling van de mier voor de MGR-inhoud, is het van cruciaal belang om niet te beschadigen van elke andere klieren of de darmen – waarvan de inhoud kunnen het monster (stap 2.5, Figuur 4 en Figuur 15) kruis-besmetten. In het optimale geval, na de extractie van de MGR-inhoud, het DG, evenals de VG zichtbaar blijven intact (Figuur 4). Besmettingen met de inhoud van het directoraat-generaal, die zich onder de MGRs bevindt, zijn moeilijk te vermijden volledig. Redenen hiervoor kunnen ook de gedeeltelijke ontwrichting van de integriteit van de klier tijdens het vervoer op droog ijs van de bemonstering-site naar het laboratorium. Het is ook mogelijk dat de directoraten-generaal beschadigd gedurende de bemonstering of in het proces van exploderen, zoals we hebben gemerkt voor de MGR in een aantal onderzochte mieren. Aangezien de inhoud van de DG kunnen dezelfde manier worden geanalyseerd als de MGR inhoud (afdelingen 3 en 4), kunnen de resultaten worden vergeleken met de resulterende gegevens na analyse van de MGR inhoud monsters (afdeling 6). In het geval van MGR inhoud plantenextracten verkregen van C. explodens mieren, beginnen de verbindingen ook opgenomen in het DG te elueren laat in het chromatogram (Figuur 12). Om te voorkomen dat DG verwarren verbindingen voor MGR bestanddelen, de respectieve metabolieten kunnen worden uitgesloten van verdere analyse. Uit studies over andere ant-soorten is bekend dat DG’s ook (zeer) vluchtige stoffen1,24 bevatten kunnen, die meestal vroeg in het GC-chromatogram Elueer.
In eerdere studies omgaan met de chemische samenstelling van de inhoud van de MGR van COCY mieren, hele mieren of hun hele gasters werden geanalyseerd16,17,18,23, overwegende dat hier de MGR inhoud zelf werden verkregen via dissectie van de mieren.
Ontleed MGR inhoud analyseren kan onderzoekers voor het uitvoeren van een breed scala aan biochemische studies, met inbegrip van de identificatie van metabolieten die erin zijn opgenomen. Aangezien de uitgevoerde studie hier op de identificatie van de vluchtige bestanddelen opgenomen in de MGR van C. explodens gericht, werd GC-MS gekozen voor haar analyse (afdeling 4). Hiervoor moeten de extracten idealiter worden gemeten onmiddellijk na bereiding of opgeslagen bij-80 ° C tot analyse. Opgemerkt moet worden dat de (uitgebreide) opslag chemische veranderingen van de extracten (zie opmerkingen na stap 3.3 en 4.2) kan veroorzaken. Aangezien de concentratie van de MGR-inhoud betrekking op een scala aan verschillende ordes van grootte hebben kan, wellicht voor het analyseren van de MGR-extracten op verschillende GC splitsen van ratio’s. Omdat de twee belangrijkste verbindingen in de MGR inhoud uittreksel van de mieren genomen om te illustreren het protocol veroorzaakt kolom overbelasting toen een splitsingsverhouding van 2:1 werd gebruikt, was in dit voorbeeld een tweede keer op een hogere split-ratio van 50: 1 (stap 4.3.1.2and Figuur 5) geanalyseerd. De GC-MS parameterinstellingen gepresenteerd in hoofdstuk 4 zijn geschikt voor gegevens die zijn gegenereerd met de GC-MS apparaten opgegeven in de Tabel van materialen. Naast de RI kalibranten (stap 4.1.1), moet ook een oplosmiddel-leeg (stap 4.1.2) worden geanalyseerd om te herkennen van niet-biologische artefacten en verontreinigende stoffen tijdens latere data-analyse. Voor de identificatie van de metaboliet is het ook belangrijk voor het meten van authentieke normen van geannoteerde stoffen dezelfde voorwaarden GC-MS zoals gebruikt voor het analyseren van de steekproef extracten (volgende stappen 5.4.7and). Ter verbetering van de nauwkeurigheid en de betrouwbaarheid van de definitieve gegevens, is het aanbevolen om het analyseren van alle monster categorieën (oplosmiddel-lege, RI kalibranten, monster extracten en normen) binnen de dezelfde volgorde van de meting. Bovendien, de authentieke normen moeten worden geanalyseerd met een concentratie die vergelijkbaar is met die waargenomen voor de monster-extracten. Dit helpt bij het verbeteren van de nauwkeurigheid van RI waarden en gelijkenis tussen monster en de standaard massaspectra, die uiteindelijk tot meer en meer zinvolle metaboliet aantekening/identificatie leiden zal. Te dien einde kunnen de normen worden herhaaldelijk gemeten met behulp van verschillende split factoren.
Voor de metaboliet identificatie, de geavanceerde software, wordt MetaboliteDetector gebruikt voor vergelijking van spectra deconvolutie en RI en spectra aan een geïmplementeerde NIST-bibliotheek ook over een gevestigde in-house bibliotheek (sectie 5). Het wordt aanbevolen voor het uitvoeren van MetaboliteDetector op een 64-bits LINUX-gebaseerd werkend systeem (bijvoorbeeld KUBUNTU) en kopieer de gegenereerde *. CDF gegevensbestanden (stap 4.4) van het draagbare apparaat voor gegevensopslag op de lokale vaste schijf. MetaboliteDetector is geschikt voor de ruwe gegevens van de GC-MS in centroid of profiel netCDF-indeling importeren. De software van de meeste GC-MS instrumenten moet zitten kundig voor de opgenomen raw gegevens omzetten in dit formaat19. Voordat u begint de data-analyse, is het sterk aanbevolen om te lezen van de literatuur beschikbaar voor eerdere versies van de software van de MetaboliteDetector vertrouwd te raken met de functies en de grafische user interface19,25, 26.
Voor het kalibreren van de RI en RI waarde nacalculatie van de samengestelde pieken aanwezig in het monster extracten, wordt een bibliotheek met RIs en spectra van RI-kalibranten (hier, n-alkanen) gebruikt. Een dergelijke bibliotheek kan zelf gevestigde, of een bestaande (‘CalibrationLibrary_Alkanes’) kunnen gedownloade27. De meegeleverde standaard kalibrant bibliotheek bevat RIs en spectra voor n-alkanen variërend van C09 tot C39 die hebben geanalyseerd zoals beschreven in sectie 4. De meegeleverde bibliotheek kan gebruikers werken met metaboliet Detector om direct te starten met het kalibratieproces van hun gegevens. Indien nodig, kan deze bibliotheek ook worden uitgebreid met extra posten voor verdere alkanen. Gebaseerd op de gelijkenis van de verwijzing en experimenteel afgeleide RIs en massaspectra (zie stap 5.3 en substappen, Figuur 7, Figuur 8, Figuur 9), annotatie of identificatie van de stoffen kan worden uitgevoerd (stap 5.4 en substappen, Figuur 11). Het is ook cruciaal dat na geautomatiseerde verwerking van gegevens met MetaboliteDetector, de gebruiker handmatig voor juiste piek picking en spectrum deconvolutie controleren zal door inspectie van massaspectra ten grondslag liggen aan de “driehoek” voor elke vermeende verbinding van belang. Bovendien, afhankelijk van de GC-MS-instrumentatie en de parameterinstellingen gebruikt voor gegevens generatie, aanpassingen van de gepresenteerde MetaboliteDetector instellingen kunnen noodzakelijk zijn. De MetaboliteDetector-software is in staat bewerkingen veel nuttiger dan uitgelegd in dit manuscript, bijvoorbeeld de weergave van uitgepakte ion huidige (EIC) chromatogrammen, export van chromatogrammen als .csv, automatische batch-kwantificering van verbindingen, en nog veel meer.
Het protocol gepresenteerd in dit manuscript kan dienen als suggestie voor experimenten uitgevoerd door andere onderzoekers zich te concentreren op isolatie van klieren of klier inhoud van insecten, volatilome analyse, evenals metaboliet identificatie.
The authors have nothing to disclose.
Financiering voor deze studie werd verkregen door de Wenen wetenschap en technologie Fonds (WWTF) LS13-048 bij RBD. Speciale dank gaat naar Diane W. Davidson (Universiteit van Utah; nu gepensioneerd) voor haar kennis over de Bornean COCY mieren met ons te delen. Wij waarderen de administraties van de Kuala Belalong veld Studies Center (KBFSC) en Universiti Brunei Darussalam (UBD) voor goedkeuring van projecten evenals van Brunei Forestry Department en Brunei van onderzoek en innovatiecentrum om toestemming voor het verzamelen van mieren en goedkeuring en uitvoervergunningen. Speciale dank gaat naar UBD en KBFSC personeel, met name Muhammad Salleh bin Abdullah Bat, Teddy Chua Wee Li, Masnah Mirasan, Rafhiah Kahar, Roshanizah Rosli, Rodzay Wahab, Chan Kin Mei en Kushan Tennakoon voor het vergemakkelijken van ons onderzoek.
Tube 50 ml, 115 x 28 mm, flat/conical base PP | Sarstedt | 62,559,001 | see Figure 1 in manuscript |
PVC Tubings | Rehau | 290 4489 | see Figure 1 in manuscript |
Mesh, stainless steel, 0.63 mm mesh size | Antstore | 1000378 | see Figure 1 in manuscript |
Freezer | Severin | KS 9890 | -20 °C or lower |
polystyrene foam box, inner dimensions 155 mm x 100 mm x 45 mm | Thorsten Koch | 4260308590481 | |
Petri dish, glass, 100 mm x 15 mm | Aldrich | BR455742 | |
Cold pack 150 mm x 100 mm | Elite Bags | 1998 | freeze to -20 °C |
Bucket with crushed ice | |||
1.5 mL Short Thread Vials, 32 x 11.6 mm, clear glass, 1st hydrolytic class, wide opening | La-Pha-Pack | 11090500 | |
Screw caps for 1.5 mL Short Thread Vials, closed, Silicon white/PTFE red septum, 55° shore A, 1.0 mm | La-Pha-Pack | 9151799 | |
Stereomicroscope | Bresser | 5806100 | |
Forceps, Superfine Tip curved | Medizinische Instrumente May, Norman May | PI-0005B | |
Forceps, Superfine Tip straight | blueINOX | BL-3408 | |
Dissection needle 140 mm, pointed, straight | Heinz Herenz Medizinalbedarf GmbH | 1110301 | |
Methanol, LC-MS CHROMASOLV, Honeywell Riedel-de Haën | fisher scientific | 15654740 | |
Distilled water | |||
Rotizell-Tissue-Tücher | Carl Roth GmbH + Co.KG | 0087.2 | |
Acetic acid ethyl ester ROTISOLV ≥99,8 % | Carl Roth GmbH + Co.KG | 4442.1 | freeze to -20 °C |
Vortex Genie 2 | neoLab | 7-0092 | |
0.1 mL micro-inserts for 1.5 mL Short Thread Vials, 31 x 6 mm, clear glass, 1st hydrolytic class, 15 mm tip | La-Pha-Pack | 06090357 | |
Screw caps for 1.5 mL Short Thread Vials, with hole, RedRubber/PTFE septum, 45° shore A, 1.0 mm | La-Pha-Pack | 9151819 | |
Alkane standard solution C8-C20 | Sigma-Aldrich | 04070 | |
Alkane standard solution C21-C40 | Sigma-Aldrich | 04071 | |
n-Hexane SupraSolv | Merck | 104371 | |
GC-autosampler, e.g. MPS2XL-Twister | Gerstel | ||
Agilent Gas chromatograph 6890 N | Agilent | ||
Gooseneck splitless Liner | Restek | 22406 | |
Helium (5.0 – F50) | Messer | 102532501 | |
GC capillary column HP-5MS UI 30 m × 0.25 mm ×0.25 µm | Agilent | 19091S-433UI | |
Agilent Mass Selective Detector 5975B | Agilent | ||
MSD ChemStation Data Analysis Application software | Agilent | ||
MetaboliteDetector software (3.1.Lisa20170127Ra-Linux) | Hiller K | download from: http://metabolitedetector.tu-bs.de/node/10 | |
Calibration Library for MetaboliteDetector | Hiller K | download from: http://metabolitedetector.tu-bs.de/node/10 | |
MD Conversion Tool for NIST-library | Hiller K | download from: http://metabolitedetector.tu-bs.de/node/10 |