ניתוח תוחלת חיים: מדידת אריכות ימים C. elegans
Published: April 30, 2023
Abstract
מקור: קורנוול, A.B., ואח ‘. שיטת קבוצת העותקים המשוכפלים: גישה בעלת תפוקה גבוהה למדידה כמותית של תוחלת החיים של קנורהאבדיטיס אלגנס . ג’יי ויס אקספ. (2018).
סרטון זה מתאר שיטה מסורתית המבוססת על צלחת למדידת תוחלת החיים של C. elegans. פרוטוקול הדוגמה מודד את תוחלת החיים של תולעים שטופלו ב- RNAi.
Protocol
הפרוטוקול הבא הוא קטע מתוך קורנוול ואח ‘, שיטת קבוצת העותקים המשוכפלים: גישה בעלת תפוקה גבוהה למדידה כמותית של אגנס קנורהאבדיטיס תוחלת חיים, J. Vis. Exp. (2018). 1. מניעת ייצור צאצאים על ידי תוספת של 5-פלואורו…
Representative Results
איור 1: שיטת ערכת העותקים המשוכפלים המסורתית והמשוכפלת לניקוד תוחלת החיים של C.elegans (A). השיטה המסורתית לניקוד C. elegans תוחלת חיים. מספר אוכלוסיות מסונכרנות קטנות של בעלי חיים isogenic לכל תנאי הם אחריו לא?…
Materials
| FuDR (5-Fluoro-2'-deoxyuridine) | Alfa Aesar | L16497 | |
| 24 Well Culture Plates | Greiner Bio-One | #662102 | |
| 600 µL 96-well plates | Greiner Bio-One | #786261 | |
| 2mL 96-well plates | Greiner Bio-One | #780286 | |
| 96-pin plate replicator | Nunc | 250520 | |
| C. elegans RNAi clone library in HT115 bacteria- Ahringer | Source Bioscience | C. elegans RNAi Collection (Ahringer) | See also Kamath et. al, Nature 2003. |
| C. elegans RNAi clone library in HT115 bacteria- Vidal | Source Bioscience | C. elegans ORF-RNAi Resource (Vidal) | See also Rual et. al, Genome Research 2004. This library is also available from Dharmacon. |
| L4440 Empty Vector Plasmid | Addgene | 1654 | https://www.addgene.org/1654/ |
Citazione di questo articolo
Lifespan Analysis: Measuring C. elegans Longevity. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20155, doi: (2023).