Dieses Video beschreibt eine traditionelle, plattenbasierte Methode zur Messung der Lebensdauer von C. elegans. Das Beispielprotokoll misst die Lebensdauer von Würmern, die mit RNAi behandelt werden.
Protocol
Das folgende Protokoll ist ein Auszug aus Cornwell et al, The Replica Set Method: A High-Throughput Approach to Quantitatively Measure Caenorhabditis elegans Lifespan, J. Vis. Exp. (2018). 1. Verhinderung der Nachkommenproduktion durch Zugabe von 5-Fluor-2′-Deoxyuridin (FUdR) Tiere bis L4-Stufe bei 20 °C anbauen. Prüfen Sie, ob sich…
Representative Results
Abbildung 1: Die traditionelle und die Replikatsatzmethode zum Scoring der C.elegans-Lebensdauer (A). Die traditionelle Methode zum Scoring der Lebensdauer von C. elegans. Mehrere kleine synchronisierte Populationen von isogenen Tieren pro Zustand werden im Laufe der Zeit verfolgt. Die gleiche Population von Tieren wird während des gesamten Studiengan…
Materials
FuDR (5-Fluoro-2'-deoxyuridine)
Alfa Aesar
L16497
24 Well Culture Plates
Greiner Bio-One
#662102
600 µL 96-well plates
Greiner Bio-One
#786261
2mL 96-well plates
Greiner Bio-One
#780286
96-pin plate replicator
Nunc
250520
C. elegans RNAi clone library in HT115 bacteria- Ahringer
Source Bioscience
C. elegans RNAi Collection (Ahringer)
See also Kamath et. al, Nature 2003.
C. elegans RNAi clone library in HT115 bacteria- Vidal
Source Bioscience
C. elegans ORF-RNAi Resource (Vidal)
See also Rual et. al, Genome Research 2004. This library is also available from Dharmacon.