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Preparazione del campione e quantificazione relativa mediante metilazione riduttiva delle ammine per studi peptidomici
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Sample Preparation and Relative Quantitation using Reductive Methylation of Amines for Peptidomics Studies
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Preparazione del campione e quantificazione relativa mediante metilazione riduttiva delle ammine per studi peptidomici

DOI:
10.3791/62971-v

•

08:00 min

•

November 04, 2021

•

, , ,
1Department of Biological and Environmental Sciences, Bioscience Institute,Sao Paulo State University (UNESP), 2Biodiversity of Coastal Environments Postgraduate Program, Bioscience Institute,Sao Paulo State University (UNESP)

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:44Peptide Extraction: Cell Culture
  • 01:30Peptide Extraction: Animal Tissues
  • 03:39Peptide Quantification with Fluorescamine
  • 04:18Reductive Methylation of Amines Labeling
  • 05:58Results: Determining Labelled Peptides Using Mass Spectroscopy
  • 07:19Conclusion

Summary

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Questo articolo descrive un metodo di preparazione del campione basato sull'inattivazione termica per preservare i peptidi endogeni evitando la degradazione post-mortem, seguito dalla quantificazione relativa utilizzando l'etichettatura isotopica più LC-MS.

Tags

Sample PreparationRelative QuantitationReductive MethylationAminesPeptidomicsProtease InactivationIsotopic LabelingNeuroblastoma CellsZebrafish BrainCellular LysateUltrafiltrationSolid-phase Extraction

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