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Cromatina Immunoprecipitazioni Analisi Utilizzando Nucleasi Micrococal nelle cellule di Mammaliana
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Chromatin Immunoprecipitation Assay Using Micrococcal Nucleases in Mammalian Cells
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Cromatina Immunoprecipitazioni Analisi Utilizzando Nucleasi Micrococal nelle cellule di Mammaliana

DOI:
10.3791/59375-v

•

11:42 min

•

May 10, 2019

•

,
1Department of Molecular and Cellular Biology,Beckman Research Institute of City of Hope

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 00:38Determination of MNase Digestion Conditions
  • 04:06Reverse Crosslinking, Purification of DNA, and Analysis of Digested Chromatin
  • 06:33Chromatin Immunoprecipitation
  • 09:24Results: Representative Microphotographs, Agarose Gel Analysis, and Occupancy in the AR Genome
  • 10:42Conclusion

Summary

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L'immunoprecipitazioni della chromatina (ChIP) è un potente strumento per comprendere i meccanismi molecolari della regolazione genica. Tuttavia, il metodo comporta difficoltà nell'ottenere la frammentazione della cromatina riproducibile mediante tosatura meccanica. Qui, forniamo un protocollo migliorato per un saggio ChIP utilizzando la digestione ezimatica.

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Keywords: Chromatin ImmunoprecipitationMicrococcal NucleasesMammalian CellsTranscriptional RegulationMolecular MechanismsCrosslinkingGlycineCell LysisMNase DigestionSonication

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