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Chromatin Immunoprecipitation Assay Using Micrococcal Nucleases in Mammalian Cells
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Chromatin Immunoprecipitation Assay Utilisation de nucléases micrococciques dans les cellules de mammifères

DOI:
10.3791/59375-v

•

11:42 min

•

May 10, 2019

•

,
1Department of Molecular and Cellular Biology,Beckman Research Institute of City of Hope

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 00:38Determination of MNase Digestion Conditions
  • 04:06Reverse Crosslinking, Purification of DNA, and Analysis of Digested Chromatin
  • 06:33Chromatin Immunoprecipitation
  • 09:24Results: Representative Microphotographs, Agarose Gel Analysis, and Occupancy in the AR Genome
  • 10:42Conclusion

Summary

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L'immunoprécipitation de chromatine (ChIP) est un outil puissant pour comprendre les mécanismes moléculaires de la régulation génique. Cependant, la méthode implique des difficultés dans l'obtention de la fragmentation de chromatine reproductible par tonte mécanique. Ici, nous fournissons un protocole amélioré pour un jeu d'enfant en utilisant la digestion enzymatique.

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Keywords: Chromatin ImmunoprecipitationMicrococcal NucleasesMammalian CellsTranscriptional RegulationMolecular MechanismsCrosslinkingGlycineCell LysisMNase DigestionSonication

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