P3HR1 세포주에서 엡스타인-바 바이러스의 분리 및 정량화

엡스타인-바 바이러스(EBV)^{는 분리된 최초의} 인간 종양 바이러스입니다1. 공식적으로 인간 헤르페스 바이러스 4 (HHV-4)²라고하는 EBV는 헤르페스 바이러스 계열의 감마 헤르페스 바이러스 아과의 일부이며 림프 암호 바이러스 속의 원형입니다. 전 세계 성인 인구의 거의 90-95%가 바이러스에 감염됩니다³. 대부분의 경우 초기 감염은 생후 3 년 이내에 발생하며 무증상이지만 청소년기에 늦게 감염이 발생하면 전염성 단핵구증⁴이라고하는 질병이 발생할 수 있습니다. EBV는 휴지기 B 세포를 감염시켜 바이러스가 잠^{복 감염 상태를} 확립하고 유지하는 증식성 B 림프구가 되도록 유도할 수 있습니다5. EBV는 언제든지 재활성화될 수 있으므로 재발성 감염으로 이어질 수 있습니다⁶.

지난 50년 동안, 일부 바이러스와 인간 악성 종양의 발달 사이의 연관성이 점점 더 명백해졌고, 오늘날 모든 인간 암의 15% 내지 20%가 바이러스 감염과 관련이 있는 것으로 추정된다⁷. EBV를 포함한 헤르페스 바이러스는 이러한 유형의 종양 바이러스⁸에 대해 가장 잘 연구 된 예 중 일부입니다. 실제로 EBV는 버킷 림프종(BL), 호지킨 림프종(HL), 미만성 거대 B 세포 림프종 및 면역저하 숙주 ^9,10의 림프증식성 질환과 같은 다양한 유형의 인간 악성 종양을 유발할 수 있습니다. EBV는 또한 전신성 자가면역 질환의 발병과 관련이 있는 것으로 나타났습니다. 이러한 자가면역 질환의 예로는 류마티스 관절염(RA), 다발성 근염-피부근염(PM-DM), 전신성 홍반성 루푸스(SLE), 혼합 결합 조직 질환(MCTD) 및 쇼그렌 증후군(SS)¹¹이 있습니다. EBV는 또한 염증성 장 질환(IBD)의 발병과 관련이 있습니다¹².

이러한 질병의 대부분은 세포 배양, 마우스 또는 EBV에 감염된 기타 유기체를 사용하여 연구하거나 모델링할 수 있습니다. 그렇기 때문에 EBV 입자는 시험관 내 또는 생체 내 모델^13,14,15,16에 관계없이 세포 또는 유기체를 감염시키는 데 필요하므로 저렴한 비용으로 바이러스 입자를 분리 할 수있는 기술을 개발해야합니다. 여기에 설명된 프로토콜은 상대적으로 접근 가능한 세포주에서 EBV 입자를 안정적으로 분리하고 대부분의 실험실에서 비용 효율적이고 쉽게 사용할 수 있는 real-time PCR을 사용하여 입자를 정량하는 쉬운 방법에 대한 지침을 제공합니다. 이는 상이한 세포주^17,18,19,20으로부터 EBV를 단리하기 위해 기술된 몇몇 다른 방법과 비교된다.

P3HR-1은 현탁액에서 자라며 EBV 유형 2 균주에 잠복하는 BL 세포주입니다. 이 세포주는 EBV 생산자이며 바이러스 입자를 생성하도록 유도 될 수 있습니다. 이 원고의 목표는 P3HR-1 세포주에서 EBV 입자를 분리한 다음 나중에 시험관 내 및 생체 내 EBV 실험 모델 모두에 사용할 수 있는 바이러스 스톡의 정량화를 허용하는 방법을 선보이는 것입니다.