FITC-デキストラン摂食:C.エレガンスにおける腸透過性を定量化する方法

Published: April 30, 2023

Abstract

出典:ル、T.A.N.、他.細菌と化学物質がカエノハブディティス・エレガンスの腸透過性に及ぼす影響を測定する。J. ヴィス・エクス(2019). 

このビデオでは、FITC標識デキストランをワームに供給することによって 、C.エレガンス 腸管腔の完全性を視覚化し、測定する方法を紹介します。 このプロトコルの例は、3,3′-ジインドリルメタン(DIM)処理および病原体供給ワームで行われたアッセイを示しています。

Protocol

このプロトコルは、Caenorhabditis elegansの腸透過性に対する細菌および化学物質の影響を測定するLe et alからの抜粋です。(2019). 化学物質(DIM)がP.エルギノーサを有するC.エレガンスの腸透過…

Representative Results

図1: C.エレガンス供給P.エルギノーザの腸透過性に対するDIMの影響.FITCデキストラン給餌なしの(A)大腸菌OP50(B)大腸菌による顕微鏡画像、(C)FITC-デキストラン給餌付きP.緑内症PAO1、および(D)P.</…

Materials

3,3’-diindolylmethane  Sigma D9568
90×15 mm Petri dishes SPL Life Sciences, South Korea 10090
Bactor Agar Beckton Dickinson REF. 214010
Formaldehyde solution  Sigma F1635
Caenorhabditis elegans N2 Caenorhabditis Genetics Center (CGC) Wild type 
Cholesterol Sigma C3045
Costa Assay Plate, 96 Well Black With Clear Flat Bottom Non-treated, No Lid Polystyrene Corning Incorporated REF. 3631
Dimethyl sulfoxide Sigma D2650
Escherichia coli OP50 Caenorhabditis Genetics Center (CGC)
Fluorescein isothiocyanate – dextran Sigma FD10S
Harmony software  PerkinElmer verson 3.5
Magnesium sulfate heptahydrate  Fisher Bioreagents BP2213-1
Fluoromount aqueous mounting medium Sigma F4680
Operetta CLS High-Content Analysis System PerkinElmer  HH16000000
Peptone Merck EMD 1.07213.1000
Pseudomonas aeruginosa PA01 Korean Collection for Type Culture KCTC NO. 1637
Sodium Chloride Fisher Bioreagents BP358-1
Stereo Microscope Nikon, Japan SMZ800N

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Citer Cet Article
FITC-Dextran Feeding: A Method to Quantify Intestinal Permeability in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20167, doi: (2023).

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