FITC-Dektran Besleme: C. eleganlarda Bağırsak Geçirgenliğini Ölçme Yöntemi
Published: April 30, 2023
Abstract
Kaynak: Le, T. A. N., vd. Bakteri ve Kimyasalların Caenorhabditis eleganlarınınBağırsak Geçirgenliği Üzerindeki Etkilerinin Ölçülmesi . J. Vis. Exp. (2019).
Bu video, FITC etiketli dektran solucanlarını besleyerek C. elegans bağırsak lümeninin bütünlüğünü görselleştirmek ve ölçmek için bir yöntem sunar. Örnek protokol, 3,3′-diindolylmethane (DIM) ile yapılan test ve patojenle beslenen solucanları gösterir.
Protocol
Bu protokol, Bakteri ve Kimyasalların Caenorhabditis elegans,J. Vis. Exp Bağırsak Geçirgenliği Üzerindeki Etkilerini Ölçen Le ve ark.’danbir alıntıdır. (2019). P. aeruginosa ile Beslenen C. eleganların Bağırsak Geçirgenliği Üzeri…
Representative Results
Şekil 1: DIM’in C. elegans’ın bağırsak geçirgenliği üzerindeki etkisi P. aeruginosa ile beslendi. FITC-dekstran beslemesi olmayan(A) E. coli OP50, (B) FITC-dekstran beslemeli E. coli, (C) FITC-dekstran beslemeli P. aeruginosa PAO1 ve …
Materials
| 3,3’-diindolylmethane | Sigma | D9568 | |
| 90×15 mm Petri dishes | SPL Life Sciences, South Korea | 10090 | |
| Bactor Agar | Beckton Dickinson | REF. 214010 | |
| Formaldehyde solution | Sigma | F1635 | |
| Caenorhabditis elegans N2 | Caenorhabditis Genetics Center (CGC) | Wild type | |
| Cholesterol | Sigma | C3045 | |
| Costa Assay Plate, 96 Well Black With Clear Flat Bottom Non-treated, No Lid Polystyrene | Corning Incorporated | REF. 3631 | |
| Dimethyl sulfoxide | Sigma | D2650 | |
| Escherichia coli OP50 | Caenorhabditis Genetics Center (CGC) | ||
| Fluorescein isothiocyanate – dextran | Sigma | FD10S | |
| Harmony software | PerkinElmer | verson 3.5 | |
| Magnesium sulfate heptahydrate | Fisher Bioreagents | BP2213-1 | |
| Fluoromount aqueous mounting medium | Sigma | F4680 | |
| Operetta CLS High-Content Analysis System | PerkinElmer | HH16000000 | |
| Peptone | Merck | EMD 1.07213.1000 | |
| Pseudomonas aeruginosa PA01 | Korean Collection for Type Culture | KCTC NO. 1637 | |
| Sodium Chloride | Fisher Bioreagents | BP358-1 | |
| Stereo Microscope | Nikon, Japan | SMZ800N |
Citer Cet Article
FITC-Dextran Feeding: A Method to Quantify Intestinal Permeability in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20167, doi: (2023).