Journal
/
Genética
/
Digital-Droplet PCR for å oppdage indelsmutasjoner i genetisk modifiserte anopheline myggpopulasjoner
JoVE Revista
Genética
This content is Free Access.
JoVE Revista Genética
Digital-Droplet PCR to Detect Indels Mutations in Genetically Modified Anopheline Mosquito Populations

Digital-Droplet PCR for å oppdage indelsmutasjoner i genetisk modifiserte anopheline myggpopulasjoner

DOI:
10.3791/62607-v

•

05:51 min

•

June 28, 2021

•

, , , ,
1Department of Microbiology & Molecular Genetics,University of California, Irvine, 2Department of Molecular Biology & Biochemistry,University of California, Irvine

Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 00:48PCR Preparation and Droplet Generation
  • 02:18PCR
  • 03:03Droplet Reading
  • 03:31Analysis
  • 04:49Results: Implications of ddPCR for NHEJ Identification and Quantification in Transgenic Anopheline Mosquitoes
  • 05:27Conclusion

Summary

Traducción Automática

Traducción Automática

Denne protokollen gir trinnene fra DNA-ekstraksjon til eksperimentelt oppsett for digital dråpe PCR (ddPCR), inkludert analyse for identifisering og kvantifisering av ikke-homologe slutt-sammenføyningshendelser (NHEJ) på målsteder etter gRNA-indusert Cas9-spalting og DNA-reparasjon. Andre bruksområder for denne metoden inkluderer applikasjoner som polymorfismedeteksjon og genredigeringsvariantverifisering.

Tags

Digital Droplet PCRDdPCRNHEJ AnalysisIndel MutationsGene-edited MosquitoGenetic VariationHigh ThroughputFast TurnaroundField AnalysisGenetically Modified Organisms

Article

Embed

Añadir a la lista de reproducción

Usage Statistics

Videos relacionados

Sammenslåing absolutt og relativ Kvantitativ PCR data for å kvantifisere Stat3 spleisevariant Avskrifter

Overvåking Spatial Segregering i Surface kolon mikrobepopulasjoner

Encellede Gene Expression Bruke Multiplex RT-qPCR å karakter heterogenitet av sjeldne lymfoide populasjoner

Villtype Blokkering PCR Kombinert med direkte sekvensering som en svært følsom metode for påvisning av lavfrekvent somatiske mutasjoner

Eneste dråpe digitale polymerasekjedereaksjons omfattende og samtidige deteksjon av mutasjoner i Hotspot regioner

Identifisering av mutasjoner ved høy oppløsning smelting i en TILLING befolkning på Rice

Bruk av frysetinte embryoer for høyeffektivitetsproduksjon av genmodifiserte mus

Levering av modifisert mRNA i en hjerteinfarkt mus modell

Vi introduserer punktmutasjoner i menneskelige pluripotente stamceller ved hjelp av sømløs genomredigering

Små bur laboratorieforsøk av genetisk konstruerte anopheline mygg

Read Article