PCR de gotas digitales para detectar mutaciones de Indels en poblaciones de mosquitos anofelinos modificados genéticamente
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June 28, 2021
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Este protocolo proporciona los pasos desde la extracción de ADN hasta la configuración experimental para la PCR digital de gotas (ddPCR), incluido el análisis para la identificación y cuantificación de eventos de unión final no homólogos (NHEJ) en sitios objetivo después de la escisión Cas9 inducida por gRNA y la reparación del ADN. Otros usos de este método incluyen aplicaciones como la detección de polimorfismo y la verificación de variantes de edición de genes.
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Carballar-Lejarazú, R., Pham, T. B., Kelsey, A., Tushar, T., James, A. A. Digital-Droplet PCR to Detect Indels Mutations in Genetically Modified Anopheline Mosquito Populations. J. Vis. Exp. (172), e62607, doi:10.3791/62607 (2021).
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