Journal
/
Genética
/
Digital-Droplet PCR at opdage Indels mutationer i genetisk modificerede Anopheline Mosquito Populationer
JoVE Revista
Genética
This content is Free Access.
JoVE Revista Genética
Digital-Droplet PCR to Detect Indels Mutations in Genetically Modified Anopheline Mosquito Populations

Digital-Droplet PCR at opdage Indels mutationer i genetisk modificerede Anopheline Mosquito Populationer

DOI:
10.3791/62607-v

•

05:51 min

•

June 28, 2021

•

, , , ,
1Department of Microbiology & Molecular Genetics,University of California, Irvine, 2Department of Molecular Biology & Biochemistry,University of California, Irvine

Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 00:48PCR Preparation and Droplet Generation
  • 02:18PCR
  • 03:03Droplet Reading
  • 03:31Analysis
  • 04:49Results: Implications of ddPCR for NHEJ Identification and Quantification in Transgenic Anopheline Mosquitoes
  • 05:27Conclusion

Summary

Traducción Automática

Traducción Automática

Denne protokol indeholder trin fra DNA-ekstraktion til eksperimentel opsætning til digital dråbe PCR (ddPCR), herunder analyse til identifikation og kvantificering af ikke-homologe slut-sammenføjning (NHEJ) begivenheder på målsteder efter gRNA-induceret Cas9 kavalergang og DNA-reparation. Andre anvendelser af denne metode omfatter applikationer såsom polymorfi afsløring og gen-redigering variant verifikation.

Tags

Digital Droplet PCRDdPCRNHEJ AnalysisIndel MutationsGene-edited MosquitoGenetic VariationHigh ThroughputFast TurnaroundField AnalysisGenetically Modified Organisms

Article

Embed

Añadir a la lista de reproducción

Usage Statistics

Videos relacionados

Fletning absolutte og relative kvantitativ PCR data at kvantificere STAT3 Splice Variant Afskrifter

Overvågning Rumlig Segregation i Surface kolonisere mikrobielle populationer

Single-celle genekspression Brug Multiplex RT-qPCR at Karakterisere Meget forskellige sjældne Lymfoide populationer

Vild type Blokering af PCR Kombineret med direkte sekventering som en yderst følsom metode til påvisning af lavfrekvent somatiske mutationer

Enkelt dråbe Digital Polymerase Chain Reaction for omfattende og samtidige påvisning af mutationer i Hotspot regioner

Identificering af mutationer ved høj opløsning smelter i en TILLING population af ris

Anvendelse af fryseoptøede embryoner til højeffektiv produktion af genetisk modificerede mus

Levering af modificeret mRNA i en myokardieinfarkt musemodel

Introduktion af punktmutationer i humane pluripotente stamceller ved hjælp af problemfri genomredigering

Små burlaboratorieforsøg med genetisk manipulerede anopheline myg

Read Article