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レトロウイルススキャン:細胞特異的調節領域を定義するためのMLV統合サイトのマッピング
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Retroviral Scanning: Mapping MLV Integration Sites to Define Cell-specific Regulatory Regions
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レトロウイルススキャン:細胞特異的調節領域を定義するためのMLV統合サイトのマッピング
DOI:
10.3791/55919-v
•
10:10 min
•
May 28, 2017
•
Oriana Romano
2
,
Ingrid Cifola
,
Valentina Poletti
,
Marco Severgnini
,
Clelia Peano
,
Gianluca De Bellis
,
Fulvio Mavilio
4
,
Annarita Miccio
2,4,5
1
Center for Genome Research, Department of Life Sciences
,
University of Modena and Reggio Emilia
,
2
Laboratory of Chromatin and Gene Regulation During Development
,
Imagine Institute
,
3
Institute for Biomedical Technologies
,
CNR
,
4
Généthon
,
5
Sorbonne Paris Cité – Université Paris Descartes
Capítulos
00:05
Título
00:45
MLV Transduction of Human Cells
01:41
Restriction Enzyme Digestion and Linker Ligation
03:05
First-round Linker-mediated PCR
03:43
Second Round Linker-mediated PCR
05:17
Library Preparation and Dilution for Massive Sequencing of MLV Integration Sites
07:53
Results: Mapping MLV Integration into Epigenetically-defined Regulatory Regions
09:23
Conclusion
Summary
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ここでは、ヒト細胞におけるモロニーマウス白血病ウイルスベースのレトロウイルスベクターの組み込み部位のゲノムワイドマッピングのためのプロトコールについて記載する。
Tags
Retroviral Scanning
MLV Integration Sites
Cell-specific Regulatory Regions
Gene Therapy
Gene Regulation
MLV-derived Retroviral Vector
EGFP Reporter Gene
Flow Cytometric Analysis
Genomic DNA Preparation
Restriction Enzyme Digestion
Linker Ligation
First-round PCR
Second-round PCR
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