Использование<em> В естественных условиях</em> Изображений для мониторинга прогрессирования Экспериментальная цитомегаловирусной инфекции у новорожденных мыши

Цитомегаловируса человека (HCMV/HHV-5) является членом β-герпесвирусов семьи. ЦМВ является весьма распространенной, условно-патогенным микроорганизмом, который обычно приобретенные в раннем возрасте так и в бессимптомной ^1. Как и все вирусы герпеса, ЦМВ сохраняется в течение всей жизни хозяина, чья иммунная система жестко контролирует репликацию вируса. Эпизоды реактивации вирусов в основном происходят у ослабленных лиц, таких как пересадка пациентов, получающих препараты для предотвращения отторжения трансплантата ^2. У взрослых HCMV также была связана с глиобластомы ^3. Кроме того, ЦМВ является известный патоген для новорожденных с незрелым иммунитетом ^4-6. Первичная инфекция у развивающегося плода или новорожденного может иметь серьезные последствия. ЦМВ инфекция является наиболее распространенной инфекционной причиной врожденных дефектов рождения и детских расстройств в развитых странах. Считается, что частота неонатальной инфекции ЦМВ влияет на 0,5-1% OF всех живорожденных среди которых 5-10% будут страдать от тяжелых симптомов, таких как микроцефалия или гипоплазии мозжечка. Кроме того, 10% ВИЧ-инфицированных детей с субклинической вирусная инфекция будет развиваться позже sequellae ведущие к умственной отсталости, потеря слуха, дефекты зрения или захват и эпилепсии ^7,8.

В отличие от других человеческих вирусов герпеса, таких как простого герпеса 1 (HSV-1/HHV-1), которые могут быть привиты на мышах по различным маршрутам впрыска ^9, цитомегаловирус репликации конкретных видов. Эта особенность сильно затруднено исследований патогенеза HCMV, которые выполняются в различных моделях на животных (мыши, крысы, морской свинки, макака-резуса) и их соответствующие подлинной узла-CMVs. Все CMVs проявляют значительное сходство в размерах генома и организации, тропизм к тканям и регуляции экспрессии генов. Они также вызывают такой же патологии в принимающих их стран. Несмотря геномного разнообразия бытьмежду HCMV и мышь цитомегаловирус (MCMV) (50% от ORF, присутствующих в человеческий вирус определены в мышиной CMV), мышиной модели недавно доказал, что предпочтительно, в основном потому, что мутантные штаммы могут быть протестированы на их способность контролировать вирусную Репликация в естественных условиях. Это привело к генетической экран, который включен оценки количества генов мыши, высказанные на взрослой стадии, которые составляют "resistome" этого вируса ^10. В целом, это означает, что MCMV-инфицированных мышей представляют собой привлекательную модель для изучения хост-вирус взаимодействия у взрослых. Разведка врожденной инфекции CMV является более сложным, так как различия в плацентарных организации слой между человеком и мышей ухудшают матери к плоду передачи вирусной инфекции у мышей. В последнее время непосредственного впрыска MCMV в плаценте в день 12,5 беременности позволило инфекции мозга новорожденных мышей, которые привели к нарушением слуха ^11. Однако, большинство яnvestigations теперь использовать внутрибрюшинного введения 4-20 HR-старые новорожденных обеспечить системное вирусное распространение потенциально ведет к гематогенной инфекции мозга, модель, которая является более актуальным, чем внутричерепные инъекции. Этот протокол важным вкладом в патогенезе CMV и, в частности, было показано, что MCMV инфекции результатов новорожденных в репликации вируса в нейрональных и глиальных клеток, расположенных в воспалительных очагов, которые проникли с мононуклеарными клетками, как макрофагами ^12. В этом докладе также описан изменены морфогенез мозжечка сопровождается снижением гранулированный пролиферацию и миграцию нейронов и индукции нескольких интерферон-стимулированных генов. Существенную роль CD8 + Т-клеток для контроля MCMV в центральной нервной системе также сообщалось той же группой ^13. Важным аспектом, который следует учитывать при анализе патологического эффекта микроб динамики заражаютиона. В случае MCMV, это особенно важно для изучения и количественной оценки прогрессирования вирусного распространение в развивающемся мозге, чтобы понять и предвидеть величину будущих нейробиологическое травм. Традиционно, количественное прогрессирование инфекции требуется регулярное жертву инфицированных животных титра возбудителя в тканях, таких как мозг, которые в противном случае недоступны. Этот тип протокола теперь оспорены необходимым улучшение благополучия животных и 3Rs (Сокращение, уточнить, заменить) принципы ^14. Использование в естественных условиях технологии визуализации может позволить резкое сокращение числа животных, которые необходимы в естественных условиях эксперименты инфекции. Здесь мы приводим и описывают временной ход анализа вирусной распространение в мозге после внутрибрюшинного MCMV-Luc инъекции мышь новорожденных. Используя ту же самую животных, мы отслеживать и контролировать в естественных местах интенсивного VIRAL репликации во время 2-недельного периода.