ניתוח בלוטת הלימפה הזחל: בידוד האיבר המייצר המוציטה Drosophila

Published: April 30, 2023

Abstract

מקור: ריימלס, T. A. ו Pfleger, C.M. שיטות לבחון את בלוטת הלימפה ואת המוציטים בזחלים Drosophila. ג’יי ויס אקספ. (2016).

סרטון זה מתאר את בלוטת הלימפה Drosophila – האתר העיקרי של hematopoiesis בזחל הזבוב – ומציג פרוטוקול לדוגמה כדי לנתח ולהרכיב את האיבר עבור אימונוהיסטוכימיה והדמיה פלואורסצנטית.

Protocol

פרוטוקול זה הוא קטע מתוך ריימלס ו Pfleger, שיטות לבחון את בלוטת הלימפה ואת המוציטים בזחלים Drosophila, J. Vis. Exp. (2016). 1. אימונוהיסטוכימיה של בלוטת הלימפה הזחלית שים לב: בלוטת הלימפה ממוקמת כשליש מהקצה החיצוני של זחל מעט מתחת למוח בצד הגבי. (ראה חץ <…

Representative Results

איור 1: במלניזציה של תאי קריסטל Vivo. A) זחלים הונחו בנפרד בצינורות PCR לפני החימום. חצים אדומים מציינים זחלים שאינם בתחתית הצינורות. ב) דפוס מלניזציה טיפוסי של תאי גביש לאחר החימום, אשר לפעמים חושף את בלוטת הלימפה (חץ…

Materials

PBS tablets MP Biomedicals 2810305
dissecting dish Corning 7220-85
microcentrifuge tube Denville C2170
silicone dissecting pad, made from Sylgard 184 kit Krayden (distributed through Fisher) NC9644388 (Fisher catalog number) Made in petri dish by mixing components of Sylgard elastomer kit according to manufacturer instructions.
stereomicroscope Morrell Instruments (Nikon distributor) mna42000, mma36300 Nikon models SMZ1000 and SMZ645
tissue wipe VWR 82003-820
forceps Electron Microscopy Sciences 72700-DZ
p200 pipette Eppendorf 3120000054
formaldehyde Fisher BP531-500
Triton Fisher BP151-500
Tween 20 Fisher BP337-500
bovine serum albumin Rocky Mountain Biologicals BSA-BSH-01K
normal goat serum Sigma G9023-10ML
normal donkey serum Sigma D9663-10ML
200 proof ethanol VWR V1001
N-propyl gallate MP Biomedicals 102747
glycerol VWR EM-4750
DAPI (4',6-diamidino-2-phenylindole) Fisher 62248
microscope cover glass, 18 mm circular Fisher 12-545-100
glass microscope slides Fisher 22-034-980
24-well plate Corning 351147
disposable transfer pipet Fisher 13-711-9AM
fluorescence microscope Zeiss Axio Imager.Z1

Play Video

Citar este artículo
Larval Lymph Gland Dissection: Isolating the Drosophila Hemocyte-Producing Organ. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20117, doi: (2023).

View Video