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Construction de mutants dans la souche 519/43 de Streptococcus pneumoniae de sérotype 1
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JoVE Journal Immunologie und Infektion
Constructing Mutants in Serotype 1 Streptococcus pneumoniae strain 519/43
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Construction de mutants dans la souche 519/43 de Streptococcus pneumoniae de sérotype 1

DOI:
10.3791/61594-v

•

06:06 min

•

September 11, 2020

•

, , , ,
1Faculty of Infections and Tropical Diseases, Department of Infection Biology,London School of Hygiene and Tropical Medicine, 2Division of Medicine,University College London, 3Division of Infection and Immunity,University College London UCL

Kapitel

  • 00:05Introduction
  • 00:35Generation of Plasmid pSD1 and Chemical Transformation of E. coli Dh5α
  • 02:03Plasmid DNA Extraction, Restriction Digestion of pSD1 and Spectinomycin Gene, and Assembly of pSD2
  • 03:03Transformation of S. pneumoniae Strain 519/43
  • 04:46Results: Confirmation of Mutagenesis
  • 05:43Conclusion

Summary

Automatische Übersetzung

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Ici, nous décrivons une souche 519/43 de sérotype 1 de S. pneumoniae qui peut être génétiquement modifiée en utilisant sa capacité à acquérir naturellement de l’ADN et un plasmide suicide. Comme preuve de principe, un mutant isogénique dans le gène de la pneumolysine (pli) a été fabriqué.

Tags

Serotype 1 Streptococcus PneumoniaeGenetic ModificationPlasmid ConstructionPSD1PSD2Spectinomycin CassetteRestriction DigestionLigationE. Coli TransformationS. Pneumoniae Culture

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