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Fluorescence Anisotropy as a Tool to Study Protein-protein Interactions

Anisotropia de fluorescência como uma ferramenta para estudar as interações proteína-proteína

DOI:
10.3791/54640-v

•

10:44 min

•

October 21, 2016

•

, ,
1Departamento de Química de Biomacromoléculas, Instituto de Química,Universidad Nacional Autónoma de México, 2Departamento de Genética del Desarrollo y Fisiología Molecular, Instituto de Biotecnología,Universidad Nacional Autónoma de México

Kapitel

  • 00:05Titel
  • 00:36SBDS-FlAsH Tag Protein Expression and Purification
  • 04:10Elongation Factor Like-1 (EFL1) Protein Expression and Purification
  • 07:07Labeling of SBDS-FlAsH with the FlAsH Fluorescent Dye 4′,5′-Bis(1,3,2 dithioarsolan-2-yl) Fluorescein and Fluorescence Anisotropy Experiments
  • 08:50Results: Evaluation of Protein-protein Interactions Using Fluorescence Anisotropy
  • 09:55Conclusion

Summary

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interações proteína estão no cerne da função de uma célula. calorimétrica técnicas espectroscópicas e são vulgarmente utilizados para os caracterizar. Aqui, descrevemos a anisotropia de fluorescência como uma ferramenta para estudar a interacção entre a proteína mutada na Síndrome Shwachman- diamante (SBDS) e o factor de alongamento como uma GTPase (EFL1).

Tags

Fluorescence AnisotropyProtein-protein InteractionsProtein BiochemistryProtein BiophysicsSBDS-FlAsH ProteinProtein PurificationNickel Affinity ColumnSulfopropyl Cation Exchanger ColumnProtein Concentration

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