Méthode pour obtenir le modèle de la respiration dans les souris sénescentes par la pléthysmographie barométrique non retenue

UBP est une technique courante pour l’évaluation des modèles respiratoires^1,2,3,4. Dans cette méthode, les souris sont placées dans une chambre fermée où les différences de pression entre la chambre principale (où l’animal est logé) et une chambre de référence sont filtrées à travers un pneumtachographe pour obtenir des valeurs. La configuration UBP qui en résulte est non invasive et non retenue et permet d’évaluer les mesures respiratoires sans l’exigence d’anesthésie ou de chirurgie. En outre, cette technique est adaptée aux études nécessitant plusieurs mesures dans la même souris au fil du temps. Des variables telles que la fréquence respiratoire, le volume des marées et la ventilation minute peuvent être quantifiées avec cette méthode, au cours d’un seul essai ou sur plusieurs essais. L’UBP du corps entier fournit également des mesures des débits de pointe et de la durée du cycle respiratoire. Ensemble, ces paramètres quantifient le modèle de respiration. Les traces respiratoires enregistrées permettent également d’examiner les données et de compter le nombre d’apnées centrales affichées dans un délai donné. Ce comptage peut être utilisé à côté d’une analyse du volume des marées et des temps inspiratoires pour évaluer d’autres altérations dans le modèle de respiration.

Tandis que plusieurs techniques non invasives de pléthysmographie existent pour l’évaluation directe des paramètres physiologiques pulmonaires, UBP de corps entier permet un moyen de dépister la fonction respiratoire avec un minimum de stress indu à la souris. La pléthysmographie de tête-out, qui utilise des mesures de débit mi-expiratoire des marées et qui est également non invasive, repose sur la retenue, comme beaucoup d’autres types de pléthysmographie (p. ex., pléthysmographie à double chambre). Bien que ces méthodes aient été utilisées dans les modèles de rongeurs pour mesurer la réactivité des voies respiratoires^5,l’utilisation de colliers de cou ou de petits tubes de retenue peut prendre des souris (contre d’autres espèces) plus longtemps pour s’acclimater et retourner leur respiration aux niveaux de repos.

L’obtention d’un segment optimal de respiration de l’air est une considération importante pour les comparaisons de base. L’utilisation accrue de systèmes de pléthysmographie disponibles dans le commerce permet de recueillir des données sur les modèles de respiration dans de nombreux laboratoires. Il est important de noter que le modèle de respiration est variable tout au long de la période de collecte, en particulier pour les souris. Cela dit, il est nécessaire de normaliser l’analyse de base comme un moyen de s’assurer que le niveau de formation des expérimentateurs ne confond pas les résultats. Il existe de nombreuses façons de recueillir un segment de respiration de l’air, servant comme un domaine de variation entre les conceptions expérimentales. Un exemple comprend la moyenne des 10-30 minutes finales de données suivant un ensemble de temps précédemment défini dans la chambre¹, tandis qu’une autre méthode consiste à attendre jusqu’à ce que la souris est visiblement calme pendant 5-10 min⁶. Ce dernier peut prendre 2-3 h pour atteindre et dans certains cas, un essai peut avoir besoin d’être abandonné si la souris n’est pas calme assez longtemps. Cette préoccupation est une considération particulièrement importante pour les souches de souris où les comportements observés sont plus anxieux et excitables⁷. Ces souris peuvent prendre plus de temps à s’adapter à l’environnement de la chambre et ne restent calmes que pour de courtes rafales de temps. Limiter le temps consacré à la collecte de base normalise le temps de chambre pour chaque souris.

Il est crucial que les expérimentateurs obtiennent une ligne de base appropriée qui englobe les valeurs de comportement au repos dans la souris, mais se produit également en temps opportun. Par conséquent, le but de ce rapport est de fournir une description des méthodes utilisées pour obtenir de courtes valeurs de base silencieuses pour les paramètres respiratoires chez les souris. De plus, nous rapportons que les apnées et les respirations augmentées peuvent être quantifiées pendant la première heure dans la chambre.