非拘束的な圧膜検査を通じた老化マウスの呼吸パターンの取得方法

UBP は、呼吸パターン¹、²、^3,、4の評価に共通する手法です。^,この方法では、マウスは、メインチャンバー(動物が収容されている場所)と参照チャンバーの間の圧力差が気胸管を通して濾過されて値を得る閉じたチャンバーに配置される。結果として生じるUBPのセットアップは非侵襲的で拘束されず、麻酔または外科の必要性なしで呼吸の処置を査定することを可能にする。さらに、この手法は、同じマウスでの複数の測定を必要とする研究に適しています。呼吸頻度、潮量、微小換気などの変数は、単一の試行中またはいくつかの試行の間に、この方法で定量化することができます。全身UBPはまたピーク流れおよび呼吸周期の持続時間の測定を提供する。これらのパラメータは、一緒に呼吸のパターンを定量化します。記録された呼吸痕はまたデータを確認し、一定期間内に表示される中央無呼吸の数を数えることを可能にする。このカウントは、呼吸のパターンにおける他の変化を測定するために、潮量および吸気時間の分析と一緒に使用することができる。

肺生理学的パラメータの直接評価のためにいくつかの非侵襲的なプレチスモグラフィー技術が存在するが、全身UBPは、マウスへの最小限の過度のストレスで呼吸機能をスクリーニングする方法を可能にする。逆流性流れ対策を利用し、非侵襲的でもあるヘッドアウトプレチスモグラフィーは、他の多くのタイプのプレチスモグラフィー(例えば、二重房胸膜造影)と同様に拘束に依存する。これらの方法は、気道応答性⁵を測定するためにげっ歯類モデルで使用されているが、首輪または小さな拘束チューブの使用は、マウス(対他の種)を慣れて休息レベルに呼吸を戻すために長くかかる可能性がある。

最適な空気呼吸セグメントを得ることは、ベースライン比較の重要な考慮事項です。市販のプレチスモグラフィーシステムの使用が増加し、多くの研究室で呼吸パターンデータの収集が可能になります。重要なことに、呼吸パターンは、特にマウスの採取期間を通して可変である。そうは言うが、実験者の訓練レベルが結果を混乱させないようにする手段として、ベースライン分析を標準化する必要がある。空気呼吸セグメントを収集する方法は数多くあり、実験計画間の変動の1つの領域として機能します。1 つの例としては、チャンバー¹内で事前に定義された時間のセットに従って、最後の 10 ~ 30 分のデータを平均化する方法が含まれます^。後者は、達成するために2〜3時間かかることがあり、場合によっては、マウスが十分に長く落ち着いていない場合、試練を放棄する必要があるかもしれません。この懸念は、観察された行動がより不安で興奮性の高いマウスの株に対する特に重要な考慮事項^である7。これらのマウスは、チャンバー環境に適応するのに時間がかかり、短い時間のバーストのためにのみ落ち着いている可能性があります。ベースライン収集に費やす時間を制限することで、各マウスのチャンバー時間を標準化します。

実験者は、マウスの安静時の動作値を包含する適切なベースラインを取得するが、タイムリーに発生することも重要です。したがって、このレポートの目的は、マウスの呼吸パラメータの短い静かなベースライン値を取得するために使用される方法の説明を提供することです。さらに、無呼吸と拡張呼吸は、チャンバーの最初の1時間の間に定量化することができることを報告する。