Summary

쥐의 사후 뇌졸중 우울증을 유도 하기 위한 중간 대뇌 동맥 폐색 기술

Published: May 22, 2019
doi:

Summary

여기에서 우리는 내부 경 동맥을 통해 중간 대뇌 동맥을 폐색 하 여 쥐의 사후 뇌졸중 우울증을 유도 하는 프로토콜을 제시. 우리는 Porsolt 강제 수영 시험과 자당 기본 설정 테스트를 사용 하 여 유도 우울한 기분을 확인 하 고 평가 합니다.

Abstract

사후 뇌졸중 우울증 (PSD)은 허 혈 성 뇌졸중으로 인해 발생 하는 모든 정신병 합병증의 가장 재발입니다. 더 큰 (약 60%) 모든 허 혈 성 뇌졸중 환자는 PSD로 고생 하 고, 장애는 건강의 증가 된 죽음과 악화를 위한 허 혈 성 뇌졸중 관련 전 구체로 여겨진다. PSD의 이상 징후는 여전히 모호 합니다. PSD의 개발과 발생의 메커니즘을 연구 하 고 치료법을 발견 하기 위해 우리는 쥐의 내부 경 동맥 (ICA)을 통해 중간 대뇌 동맥 (MCA)을 폐색 해야 하는 새로운 프로토콜을 개발 하려고 시도 했습니다. 이 프로토콜은 중간 대뇌 동맥 폐색 (MCAO)을 통해 쥐에 유도 된 PSD의 모델을 기술 한다. 또한 실험에서 사용 되는 Porsolt 강제 수영 시험과 자당 선호도 검사는 조사 중인 쥐의 우울한 기분을 확인 하 고 평가 하는 것입니다. 원래 절차에 규정 된 것 처럼 외부 경 동맥 (ECA)을 통해 카 테 터를 삽입 하는 대신,이 MCAO 기술은 ICA를 통해 직접 전달 되는 모노 필 라 멘 트를가지고 있습니다. 이 MCAO 기술은 몇 년 전에 개발 되었으며 사망률과 가변성의 감소로 이어집니다. 일반적으로 사용 되는 기준은 생물학적 모델의 선택에서 선호 되는 것으로 받아들여진다. 이 프로토콜로 얻어진 데이터는 MCAO의이 모형은 쥐에 있는 PSD를 유도 하는 방법이 고 잠재적으로 병 리 생리학 및 새로운 약 및 그밖 신경 보호 에이전트의 미래 발달의 이해로 이끌어 낼 수 있다는 것을 보여줍니다.

Introduction

뇌졸중은 미국1,2,3에 있는 죽음-가해자 질병의 목록에 넷째, 그것은 선진국에서 성인에서 장애의 대부분을 야기 하는 동안4; 이것은 뇌졸중 세계에서 가장 중요 한 건강 문제 중 선도적 인 경쟁자를 만든다. 뇌졸중 생존 환자에서 정상은 드문, 영구 장애를 겪고 생존 피해자의 약 15%-40%, 뇌졸중 발병5후 3 개월 기관 치료를 필요로 하는 20%, 그리고 6 개월 생존의 1/3은 그들이 사는 데 도움이 필요 매일6. 뇌졸중은 또한 상승 국가 건강 지출에 대 한 계정7. 미국 심장 협회의 추정치는 20108에서 $500억 이상에서 미국에서 뇌졸중 관련 비용을가지고 있다.

뇌졸중은 개인의 장기적인 손상을 유발할 뿐만 아니라 치 매, 피로, 불안, 우울증, 정신 착 란 및 침략과 같은 정서적 및 행동 장애를 겪는 경향이 있습니다. ,13,14. 뇌졸중 후 가장 재발 심리적 속 편은 사후 뇌졸중 우울증 (PSD), 생존15의 50%에서 진단,17. 뇌졸중 유발 우울증은 발병 률과 사망률이 증가하 고,19,20,21을 초래 한다. PSD의 병 태 생리학은 완전히 알려지지 않았지만, 여러 가지 요인에 의해 발생 하 고 장애, 인지 장애 및 변 부 부위23에 연결 되어 있습니다.

MCAO에 의해 생성 된 초점 뇌 허 혈의 쥐 모델은 뇌졸중24,25,26,27의 가장 광범위 한 동물 모델입니다. ICA를 통해 MCA를 폐색 하 여 쥐의 PSD를 유도 하는 것을 시연 하면서 MCAO 모델의 사망률과 가변성을 최소화 하는 기술은28을 사용 합니다.

이 프로토콜의 주요 목적은 사망률과 변동성28의 결과를 감소 시키는 MCAO의 수정 된 모델인 ICA를 통해 MCA를 폐색 하 여 쥐에서 PSD를 유도 하는 단계를 간략하게 설명 하는 것입니다. 특정 목표는 신경학 적 및 조직학 검사를 수행 하는 것을 포함 합니다 (신경학 적 심각도 점수 [NSS], 경색 영역의 부피 및 뇌 부 종을 결정) MCAO의 효능을 확인 하 고 행동 테스트를 사용 하 여 검사 정서적 장애, 주로 PSD의 개발에이 MCAO 절차의 영향.

Protocol

이스라엘 네 게 브의 벤 구리 온 대학의 동물 관리 위원회는이 의정서에 사용 된 모든 치료 및 시험 절차를 승인 했습니다. 1. 실험 절차를 위한 쥐의 제조 참고: 300-350 g의 무게를 가진 성인 남성을 선택 합니다. 1 개의 케이지 당 4 마리의 쥐를, 22 ° c의 비 바리 움과 40%의 습도에서 반전 된 12 시간 빛/어둠의 순환 (8:00 오전에 소등)과 음?…

Representative Results

조직 학적 소견 (표 1)은 MCAO 군에서 동물에 비하여 통계적으로 유의 한 경색 부피를 총 뇌 (p < 0.0001)의 백분율로 밝혀 내었다. 또한 실험 군에서 평가 되 면 통계적으로 유의 한 뇌 부 종 (p < 0.0003)이 그를 샴 대조 군의 것과 나란히 배치 하였다 고 보고 하였다. 표 2에 나타난 바와 같이, 얻?…

Discussion

여기에 제시 된 MCAO 기술이 원래의 MCAO 모델 보다 안전 하다 고 간주 될 수 있는 방법 중 하나는 ECA 및 후 두 동맥, 터미널 언어, 및 상 악 동맥을 포함 한 그 가지가 손상 되지 않는다는 사실에 의해 예시 된다 ICA를 통해 MCA를 폐색 할 때. MCAO (및 해당 분기)의 원래 모델의 오프셋 (및 그 지점), 거리 해 부 및 응고 하 여46, 손상 된 저작 원인, 혈관 공급에 타협으로 인해 근육을 저작 ?…

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

생리, 생태 및 의학의 학부 Olena 세이 베 스 카 교수님에 게 감사의 말을 드리며, 오 레 스 Honchar 드니프로 대학, 드니프로, 우크라이나의 지원 및 토론에 도움이 되는 공헌에 감사 드립니다. 얻어진 데이터는 R.K. 박사 학위 논문의 일부입니다.

Materials

Absorbent pad
Black lusterless perspex box (120 cm × 60 cm × 60 cm), divided into a 25% central zone and the surrounding border zone
Bottles Techniplast ACBT0262SU 150 ml bottles filled with 100 ml of water and 100 ml 1%(w/v) sucrose solution
Electric Shock Heat System Ultasonic Inc.
Horizon-XL Mennen Medical Ltd
Imaging System Kodak For imaging and quantification
Monofilament
Paper towels Pharmacy Dry towels used for keeping rats dry after immersing them in water
Pexiglass cylinder a 100 cm tall and 40 cm in diameter cylinder used for carrying out the forced swim test
Purina Chow Purina 5001 Rodent laboratory chow given to rats, mice and hamster is a life-cycle nutrition that has been used in biomedical researc for over 5 decades. Provided to rats ad libitum in this experiment
Rat Cages Techniplast 2000P Conventional housing for rodents. Was used for housing rats throughout the experiment
Scanner  Canon CanoScan 4200F
Video Camera ETHO-VISION (Noldus) Digital video camera for high definition recording of rat behavior under open field test

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Diesen Artikel zitieren
Kuts, R., Melamed, I., Shiyntum, H. N., Frank, D., Grinshpun, J., Zlotnik, A., Brotfain, E., Dubilet, M., Natanel, D., Boyko, M. A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats. J. Vis. Exp. (147), e58875, doi:10.3791/58875 (2019).

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