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マイクロフルイディクスと蛍光顕微鏡を使用して、単一アクチンフィラメントおよびバンドルのアセンブリダイナミクスを研究する
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JoVE 杂志 生物化学
Using Microfluidics and Fluorescence Microscopy to Study the Assembly Dynamics of Single Actin Filaments and Bundles
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マイクロフルイディクスと蛍光顕微鏡を使用して、単一アクチンフィラメントおよびバンドルのアセンブリダイナミクスを研究する

DOI:
10.3791/63891-v

•

08:02 min

•

May 05, 2022

•

, , , ,
1Université Paris Cité, CNRS,Institut Jacques Monod

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:40Polydimethylsiloxane (PDMS) Chamber Assembly
  • 01:45Connect Microfluidic Device
  • 03:11Configuring the Setup with Standard Flow Rates and Changing Solution
  • 04:21Basic Single Filament Experiment: Adenosine Diphosphate (ADP)-Actin Barbed End Depolymerization
  • 06:45Results: Polymerization of Actin Filaments from Spectrin-Actin Seeds when Exposed to Different Actin Binding Proteins
  • 07:24Conclusion

Summary

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我々は、蛍光顕微鏡法と組み合わせて、個々のアクチンフィラメントをリアルタイムで正確に監視しながら、異なるタンパク質溶液に順次曝露することを可能にする、単純なアクチンフィラメントマイクロ流体アッセイのプロトコルを提示する。

Tags

MicrofluidicsFluorescence MicroscopyActin FilamentsActin BundlesAssembly DynamicsActin-binding ProteinsPDMS ChamberF-bufferPressure ControlAir Bubbles

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