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In Vitro Transcribed RNA-basierter Luciferase Reporter Assay to Study Translation Regulation in Poxvirus-infizierten Zellen
JoVE 杂志
免疫与感染
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JoVE 杂志 免疫与感染
In Vitro Transcribed RNA-based Luciferase Reporter Assay to Study Translation Regulation in Poxvirus-infected Cells
DOI:

08:58 min

May 01, 2019

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Chapters

  • 00:04Title
  • 00:42DNA Template Preparation by PCR for In Vitro Transcription
  • 03:20mRNA Generation by In Vitro Transcription
  • 04:22Cells Transfection with mRNA
  • 06:04Luciferase Activity Measurement
  • 07:29Results: Translation Efficiency of a Fluc mRNA Determined by Luciferase Reporter Assay
  • 08:21Conclusion

Summary

自动翻译

Wir legen ein Protokoll vor, um die mRNA-Übersetzungsverordnung in poxvirus-infizierten Zellen zu untersuchen, die in vitro Transcribed RNA-based luciferase reporter Assay verwendet werden. Der Test kann für das Studium der Übersetzungsregulierung durch cis-Elemente einer mRNA verwendet werden, einschließlich 5 '-unübersetzter Region (UTR) und 3 '-UTR. Mit dieser Methode können auch verschiedene Übersetzungsinitiationsmodi untersucht werden.

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