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Ensayo in vitro transcrito luciferase Reporter basado en ARN para estudiar el Reglamento de traducción en las células infectadas por el poxvirus
JoVE 杂志
免疫与感染
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JoVE 杂志 免疫与感染
In Vitro Transcribed RNA-based Luciferase Reporter Assay to Study Translation Regulation in Poxvirus-infected Cells
DOI:

08:58 min

May 01, 2019

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Chapters

  • 00:04Title
  • 00:42DNA Template Preparation by PCR for In Vitro Transcription
  • 03:20mRNA Generation by In Vitro Transcription
  • 04:22Cells Transfection with mRNA
  • 06:04Luciferase Activity Measurement
  • 07:29Results: Translation Efficiency of a Fluc mRNA Determined by Luciferase Reporter Assay
  • 08:21Conclusion

Summary

自动翻译

Presentamos un protocolo para estudiar la regulación de la traducción de mRNA en células infectadas por poxvirus usando el ensayo de reportero de luciferasa transcrito in vitro basado en ARN. El ensayo se puede utilizar para estudiar la regulación de la traducción por CIS-Elements de un mRNA, incluyendo 5 '-región no traducida (UTR) y 3 '-UTR. También se pueden examinar diferentes modos de iniciación de la traducción utilizando este método.

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