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In vitro transcrit le test de reporter de luciférase basé sur l’ARN pour étudier la régulation de la traduction dans les cellules infectées par le poxvirus
JoVE 杂志
免疫与感染
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JoVE 杂志 免疫与感染
In Vitro Transcribed RNA-based Luciferase Reporter Assay to Study Translation Regulation in Poxvirus-infected Cells
DOI:

08:58 min

May 01, 2019

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Chapters

  • 00:04Title
  • 00:42DNA Template Preparation by PCR for In Vitro Transcription
  • 03:20mRNA Generation by In Vitro Transcription
  • 04:22Cells Transfection with mRNA
  • 06:04Luciferase Activity Measurement
  • 07:29Results: Translation Efficiency of a Fluc mRNA Determined by Luciferase Reporter Assay
  • 08:21Conclusion

Summary

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Nous présentons un protocole pour étudier la régulation de la traduction des mRNA dans les cellules infectées par le poxvirus à l’aide du test de reporter de luciférase basé sur l’ARN transcrit in vitro. Le dosage peut être utilisé pour étudier la régulation de la traduction par les éléments CISd’un mRNA, y compris la région 5 '-non traduite (UTR) et 3 '-UTR. Différents modes d’initiation de traduction peuvent également être examinés à l’aide de cette méthode.

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