需要订阅 JoVE 才能查看此. 登录或开始免费试用。
Chapters
- 00:04Title
- 00:42DNA Template Preparation by PCR for In Vitro Transcription
- 03:20mRNA Generation by In Vitro Transcription
- 04:22Cells Transfection with mRNA
- 06:04Luciferase Activity Measurement
- 07:29Results: Translation Efficiency of a Fluc mRNA Determined by Luciferase Reporter Assay
- 08:21Conclusion
Vi præsenterer en protokol for at studere mRNA-oversættelses regulering i poxvirus-inficerede celler ved hjælp af in vitro transskriberet RNA-baseret luciferase reporter assay. Analysen kan bruges til at studere oversættelse regulering af CIS-elementer i en mRNA, herunder 5 '-uoversat region (UTR) og 3 '-UTR. Forskellige oversættelses Initierings tilstande kan også undersøges ved hjælp af denne metode.
