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Un lievito modificato - un sistema ibrido per studi di interazione tra DNA e proteine ​​eteromeriche
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JoVE 杂志 生物化学
A Modified Yeast-one Hybrid System for Heteromeric Protein Complex-DNA Interaction Studies
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Un lievito modificato - un sistema ibrido per studi di interazione tra DNA e proteine ​​eteromeriche

DOI:
10.3791/56080-v

•

10:47 min

•

July 24, 2017

•

, ,
1Department of Neurology,University of Southern California, 2Section of Cell and Developmental Biology,University of California San Diego

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:40Preparation of Competent Cells
  • 02:40Co-transformation of Cells by Heat Shock
  • 04:39Transferring Cells onto New Plates
  • 05:25Preparing Culture for Measuring β-galactosidase Activity
  • 08:14Measuring β-galactosidase Activity
  • 09:07Results: Y1.5H Assay Detects Heteromeric Protein-DNA Interactions
  • 09:50Conclusion

Summary

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Il saggio di un ibrido di lievito modificato qui descritto è un'estensione del saggio classico del lievito un ibrido (Y1H) per studiare e convalidare l'interazione heteromera della proteina-complesso del DNA in un sistema eterologo per qualsiasi studio genomico funzionale.

Tags

Yeast-one HybridHeteromeric Protein ComplexDNA InteractionFunctional GenomicsProtein-DNA InteractionsCo-transformationTE Lithium AcetateYPDA MediumCompetent CellsNormalization Control

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