Summary

Procedimiento transuretral instilación en ratón macho adulto

Published: November 02, 2017
doi:

Summary

La instilación transuretral es un procedimiento difícil y no ha sido bien descrita en la literatura. El objetivo de este manuscrito es describir una técnica para la inserción transuretral de un catéter para la administración intravesical de líquidos con sustancias activas en la vejiga o la próstata en ratones macho adultos.

Abstract

Instilación transuretral puede utilizarse para ofrecer diferentes soluciones con principios activos (p. ej., drogas, productos químicos, bacterias y virus) localmente en la vejiga urinaria para inducir modelos animales de patologías de vejiga o evaluar la efectividad de los tratamientos intravesical. Más roedores modelos de patologías de vías urinarias (LUT) inferiores son inducidos en ratones hembra debido a la facilidad de instilación intravesical de las sustancias a través de la uretra femenina. Sin embargo, debido a las diferencias anatómicas entre el LUT femenina y masculina, instilación transuretral en un ratón macho ha sido considerada un procedimiento muy difícil, y no se ha descrito previamente. En este manuscrito, nos proporcionan una descripción detallada de cómo preparar tubería de polietileno (PE) para la posterior inserción en la uretra de un ratón macho. Además, discutimos los tipos ideales de la tubería de PE a utilizar dependiendo del sitio deseado de la inoculación. Además, se describe punto por punto cómo preparar un animal para un exitoso instilación transuretral evitar lesiones en la uretra y asegurar la entrega de la solución a la ubicación deseada. El procedimiento es iniciado por retraer el prepucio y el glande para exponer la apertura del meato uretral. A continuación, el glande son tomados por Roma fórceps no machacar para estabilizar el pene y la tubería de PE. La tubería de PE se inserta por primera vez en el meatus uretral paralelo al cuerpo animal, entonces su ángulo está ajustado inclinando el catéter para maniobrarlo para seguir la curvatura natural de la uretra. Esta técnica puede utilizarse en modelos murinos inducidos de patologías de vejiga o evaluar la efectividad de los tratamientos intravesical en ratones machos.

Introduction

El enfoque de instilación transuretral se ha utilizado en estudios anteriores como uno de los métodos para crear modelos de roedores de vejiga patologías1,2,3,4 y puede usarse para evaluar la efectividad de los tratamientos locales entregados en ratones. Aunque los modelos animales no pueden recapitular completamente patologías humanas, identificación de los mecanismos subyacentes en los estudios animales proporciona una mejor comprensión de los trastornos humanos de LUT como síndrome de dolor de la cistitis intersticial, vejiga, neurogénico cistitis, cistitis autoinmune e inflamación prostática5.

El procedimiento transuretral instilación realizado en un ratón macho adulto es técnicamente más difícil que la instilación intravesical de un ratón hembra adulto6. La anatomía naturalmente curvada de la uretra masculina junto con su pequeño diámetro hace técnicamente difícil de lograr la inserción transuretral de un catéter. Por lo tanto, instrucciones detalladas para la inducción transuretral de ratón de la infección de vías urinarias6 y LUT inflamación7,8,9,10,11 , 12 , 13 , 14 , 15 vía el catéter insertado en la vejiga se esbozaron anteriormente para ratones femeninos solamente. Este manuscrito tiene como objetivo proporcionar una descripción paso a paso de la técnica de transuretral instilación de sustancias en los ratones machos incluyendo los clips de vídeo, imágenes e ilustraciones. Transuretral instilación variable pueden realizar procedimientos en un ratón macho adulto inocula similar al anteriormente descrito en el ratón hembra7 y combinado con técnicas adicionales tales como grabaciones de Electromiograma de respuestas visceromotor (VMR)16.

Protocol

todos los procedimientos con animales, incluyendo el método y la duración de la anestesia, así como cuidados postoperatorios, se habla con un veterinario y aprobados por la atención institucional Animal y el Comité uso (IACUC) en el institución afiliada. En este manuscrito, todos los procedimientos se realizaron con 8 a ratones machos de 15 semanas de edad C57BL/6 y el protocolo sigue las pautas de cuidado de los animales aprobadas por el IACUC en la Universidad de Colorado. 1. preparaci…

Representative Results

Instilación transuretral de colorante azul a través de tubería de PE 50 dio lugar a la instilación de contraste en la vejiga urinaria (Figura 4A) y a través de 10 PE tubo de coloración de la SV y AP (Figura 4B), respectivamente. Para evaluar si la instilación transuretral realizada provoca un reflujo inmediato del inóculo a los riñones o no, el riñón y el uréter se observaron seguida por la instilación de 100 μl del…

Discussion

Este manuscrito describe detalladamente un método de instilación transuretral en ratón macho adulto. Área siembra primaria diferencial puede llegar mediante el uso de tubería de PE de diferentes diámetros. PE-50 se recomienda para llegar con éxito a la luz de la vejiga urinaria, mientras que un diámetro mayor que PE-10 se utiliza para llegar a la AP y la SV (Figura 3A-B). Además de la elección del tamaño de la tubería de PE y órgano Diana para la inoculación, o…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Los autores no tienen ningún reconocimiento.

Materials

BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 10 BD Medical 63019-004
BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 50 BD Medical 63019-048
BD Insyte-N Autoguard/ Angiocath BD Medical 311411
Ethanol (EtOH) Fisher Scientific BP2818500
BD Needle Only 22 Gauge (G) 1 inch Becton Dickson 205155
BD Needle Only 27 Gauge (G) 1/2 inch Becton Dickson 305129
Luer stub, 22 G X 0.5 in / Blunt Needle Instech LS22
Luer stub, 27 G X 0.5 in / Blunt Needle Instech LS27
6" Long x 2" Wide x 1" Thick, Aluminum Oxide Sharpening Stone / Oil Stone Norton 40204034
Surgical Lubricant Sterile Bacteriostatic Folilpac Surgilube 281020543
Isoflurane Fluriso 13985-528-60
SomnoSuite Low-Flow Anesthesia System Kent Scientific SS-01
Dissecting Forceps, Curved vwr 82027-392
BD 1 ml Syringe BD Medical 309626
India Ink Solution., 0.2% in PBS buffer Alfa Aesar J61007
8~12 weeks old male C57B/6 Mice Jackson Lab #000664

References

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Cite This Article
Lee, S., Carrasco Jr., A., Meacham, R. B., Malykhina, A. P. Transurethral Instillation Procedure in Adult Male Mouse. J. Vis. Exp. (129), e56663, doi:10.3791/56663 (2017).

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