Summary

大人の雄のマウスに経尿道的注入手順

Published: November 02, 2017
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Summary

経尿道的注入が困難なプロシージャであり、文献にも記載されていません。本稿の目的は、大人の男性マウスの前立腺や膀胱に活性物質と液体の膀胱配信するためカテーテルの尿道挿入の技術を記述するためです。

Abstract

尿道注入を使用する膀胱膀胱の病態モデル動物を誘導するかを評価するにローカル有効成分 (例えば薬剤、化学物質、細菌、およびウイルス) とさまざまなソリューションを提供することができます、膀胱内注入治療効果。下部尿路 (LUT) 病態の最も齧歯動物モデルは、女性の尿道を介して物質の膀胱内注入を容易にするため雌マウスに誘導されます。しかし、女性と男性の LUT で解剖学的な違いがあるため男性マウスに経尿道的注入は非常に挑戦的なプロシージャとみなされている、以前記載されていません。本稿では、雄マウスの尿道にその後挿入するためポリエチレン (PE) 管を準備する方法の詳細な説明を提供します。また、接種の目的のサイトによって使用される PE チューブの理想的な種類をについて説明します。さらに、ポイント ポイントで尿道の損傷を回避し、目的の場所へのソリューションの配信に成功した経尿道的投与の動物を準備する方法について述べる.手順は、包皮、尿道口の開口部を公開する亀頭の取り消しによって開始されます。次に、亀頭は、陰茎と PE チューブを安定させるために鈍的非破砕, 鉗子で把持です。PE チューブが尿道口動物の体に平行に挿入し、尿道の自然の曲率を次にそれを操縦するカテーテルを傾けることによって角度を調整します。この手法は、誘導膀胱病態モデルマウスを使用したり、男性マウスの膀胱内注入治療の有効性を評価します。

Introduction

経尿道的注入アプローチ前の研究で膀胱の病態1,2,3,4の齧歯動物モデルを作成する方法の 1 つとして使用されています、評価に使用することができます、マウスでローカルに配送された治療法の有効性動物モデルできない人間の病理を要約して完全に、動物研究の基になるメカニズムの同定は、間質性膀胱炎/膀胱痛症候群、神経因性など人間の LUT 疾患の理解を深める膀胱炎、自己免疫性の膀胱炎と前立腺の炎症5

大人の雄マウスに経尿道的注入術は大人の雌マウス6の膀胱内注入よりももっと技術的に挑戦的です。その小径と一緒に男性の尿道の自然に湾曲した解剖学は、尿道へのカテーテル挿入を達成するが技術的に難しくなっています。したがって、する詳しい手順を経尿道的誘導マウス尿路感染症6と LUT 炎症7,8,9,10,11,12,13,14,前述の雌マウスだけの膀胱に挿入されたカテーテルを介して15だった。この原稿は、雄マウスのビデオ クリップ、画像、イラストなどの物質の経尿道的注入の技術の段階的な説明を提供するために目指しています。経尿道的注入変数を持つ大人の男性マウスの手順を実行できますが類似する以前の筋電図記録などの追加のテクニックを吸収合併し、雌マウス7に記載されている再接種します。観た応答 (VMR)16

Protocol

方法と術後のケアと同様に、麻酔科の期間を含む動物のすべてのプロシージャが獣医に相談し、制度的ケアおよび使用委員会 (IACUC)、によって承認された、所属機関。本稿では、すべての手順を行った 15 週齢の c57bl/6 男性マウスに 8 とプロトコル コロラド大学で IACUC によって承認されたアニマル ・ ケアのガイドラインに従います。 1 チューブ準備 …

Representative Results

PE 50 チューブを介して青色色素の経尿道的注入はそれぞれ膀胱 (図 4 a) と SV と AP (図 4 b) のカラリゼーションにおける PE 10 チューブを介して色素の注入で起因しました。行う経尿道的教養を高める腎臓へ菌のインスタント逆流を発生は、またはないかどうかを評価するため、腎臓と尿管青い染料・蛍光染料 (<strong class="xfig"…

Discussion

この原稿は、大人の男性マウスに経尿道的注入法を詳しく説明します。差分のプライマリ シード領域は、異径 PE 管を使用してアクセスできます。PE 50 PE 10 を使用して AP と SV (図 3 aB) に到達する大径ながら、膀胱内腔に正常に到達するため勧めします。PE チューブと接種の標的臓器のサイズの選択に加えて植え付け接種材料の量など、他の要因はまた終了?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

著者には、任意の受信確認がありません。

Materials

BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 10 BD Medical 63019-004
BD INTRAMEDIC Polyethylene Tubing/ PE 50 BD Medical 63019-048
BD Insyte-N Autoguard/ Angiocath BD Medical 311411
Ethanol (EtOH) Fisher Scientific BP2818500
BD Needle Only 22 Gauge (G) 1 inch Becton Dickson 205155
BD Needle Only 27 Gauge (G) 1/2 inch Becton Dickson 305129
Luer stub, 22 G X 0.5 in / Blunt Needle Instech LS22
Luer stub, 27 G X 0.5 in / Blunt Needle Instech LS27
6" Long x 2" Wide x 1" Thick, Aluminum Oxide Sharpening Stone / Oil Stone Norton 40204034
Surgical Lubricant Sterile Bacteriostatic Folilpac Surgilube 281020543
Isoflurane Fluriso 13985-528-60
SomnoSuite Low-Flow Anesthesia System Kent Scientific SS-01
Dissecting Forceps, Curved vwr 82027-392
BD 1 ml Syringe BD Medical 309626
India Ink Solution., 0.2% in PBS buffer Alfa Aesar J61007
8~12 weeks old male C57B/6 Mice Jackson Lab #000664

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Cite This Article
Lee, S., Carrasco Jr., A., Meacham, R. B., Malykhina, A. P. Transurethral Instillation Procedure in Adult Male Mouse. J. Vis. Exp. (129), e56663, doi:10.3791/56663 (2017).

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