Affinity Purification of a 6X-His-Tagged Protein using a Fast Protein Liquid Chromatography System

Madhumita Sridharan; Tripthi Battapadi; Lata Balakrishnan

doi:10.3791/66529

Journal

Biochemistry

Optimizing FPLC for Efficient Purification of His-Tagged FEN1 Protein

April 26, 2024

Purificazione per affinità di una proteina marcata 6X-His-Tagged utilizzando un sistema di cromatografia liquida proteica veloce

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Preparazione e confezionamento di colonne di affinità per cromatografia liquida proteica veloce (FPLC)

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Priming del circuito del campione del sistema di cromatografia liquida veloce delle proteine (FPLC) per la purificazione della proteina FEN1 marcata con His.

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Purificazione della proteina FEN1 marcata con His-Tagged mediante il sistema FPLC e sua analisi con software collegato a FPLC

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Madhumita Sridharan¹, Tripthi Battapadi¹, Lata Balakrishnan¹

¹Department of Biology,Indiana University Indianapolis

Summary

Questo articolo fornisce una procedura per la purificazione per affinità di una proteina ricombinante umana, l’endonucleasi del lembo 1 (FEN1), che è stata marcata con un tag 6X-istidina. Il protocollo prevede l’utilizzo di due distinte colonne ioniche metalliche immobilizzate per la purificazione della proteina marcata.