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Ein fluoreszenzbasierter Assay des Membranpotentials zur Hochdurchsatz-Funktionsuntersuchung zweier endogener Ionenkanäle in zwei Epithelzelllinien
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A Fluorescence-Based Assay of Membrane Potential for High-Throughput Functional Study of Two Endogenous Ion Channels in Two Epithelial Cell Lines
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Ein fluoreszenzbasierter Assay des Membranpotentials zur Hochdurchsatz-Funktionsuntersuchung zweier endogener Ionenkanäle in zwei Epithelzelllinien

Deutsch

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06:59 min

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June 22, 2022

DOI:

10.3791/63528-v

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10.3791/63528-v

•

06:59 min
June 22, 2022

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1Molecular Medicine,Hospital for Sick Children, 2Cell Biology,Hospital for Sick Children, 3Department of Physiology,University of Toronto, 4Department of Paediatrics,University of Toronto, 5Department of Biochemistry,University of Toronto

Summary

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Dieses Protokoll beschreibt eine Methode zur Untersuchung von elektrogenen Membranproteinen durch Messung von Änderungen des Membranpotentials. Dieser Assay bietet eine Plattform für die funktionelle Auslesung mehrerer Ionenkanäle, die endogen in Epithelzelllinien exprimiert werden.

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Fluorescence-based AssayMembrane PotentialHigh-throughputIon ChannelsEpithelial CellsCalu-3Caco-2Cell CultureTrypsin96-well Plate384-well PlateSodium-free BufferChloride-free BufferNMDG

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Xia, S., Di Paola, M., Jones, N. L., Bear, C. E. A Fluorescence-Based Assay of Membrane Potential for High-Throughput Functional Study of Two Endogenous Ion Channels in Two Epithelial Cell Lines. J. Vis. Exp. (184), e63528, doi:10.3791/63528 (2022).

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