Här ger vi ett protokoll för att generera in vitro-NMJs från mänskliga inducerade pluripotenta stamceller (iPSCs). Denna metod kan inducera NMJs med mogen morfologi och funktion i 1 månad i en enda brunn. De resulterande NMJs skulle kunna användas för att modellera relaterade sjukdomar, att studera patologiska mekanismer eller att skärmen läkemedelsföreningar för terapi.