Journal
/
/
In Vitro Instrueret Udviklingen af en begrænsning Endonuclease med strengere specificitet
JoVE Journal
Genetics
This content is Free Access.
JoVE Journal Genetics
In Vitro Directed Evolution of a Restriction Endonuclease with More Stringent Specificity

In Vitro Instrueret Udviklingen af en begrænsning Endonuclease med strengere specificitet

6,891 Views

09:16 min

March 25, 2020

DOI:

09:16 min
March 25, 2020

1 Views
,

Summary

Automatically generated

Restriktionen endonucleases med ny sekvens specificitet kan udvikles fra enzymer, der genkender en delvist degenereret sekvens. Her giver vi en detaljeret protokol, som vi med succes har brugt til at ændre sekvensspecificiteten af NlaIV-enzymet. De vigtigste ingredienser i protokollen er in vitro-opdelingen af transskriptions-/oversættelsesreaktionen og udvælgelsen af varianter med nye sekvensspecificiteter.

Read Article