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Um protocolo baseado em FACS para isolar o RNA das células secundárias de glândulas acessórias masculinas de Drosophila
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A FACS-based Protocol to Isolate RNA from the Secondary Cells of Drosophila Male Accessory Glands

Um protocolo baseado em FACS para isolar o RNA das células secundárias de glândulas acessórias masculinas de Drosophila

DOI:
10.3791/60218-v

•

06:54 min

•

September 05, 2019

•

, ,
1Department of Genetics and Evolution,University of Geneva

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:03Accessory Gland Dissection
  • 02:50Tissue Digestion and Mechanical Cell Dissociation
  • 04:08Results: Representative Secondary Cell (SC) RNA Isolation and Analysis
  • 05:55Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Aqui, nós apresentamos um protocolo para dissociar e classificar uma população específica da pilha das glândulas acessórias masculinas de Drosophila (pilhas secundárias) para o sequenciamento do RNA e o RT-qPCR. A isolação da pilha é conseguida com a purificação de FACS de pilhas secundárias GFP-expressando após um processo multistep-dissociation que exige a dissecção, a digestão dos proteases e a dispersão mecânica.

Tags

FACSDrosophilaMale Accessory GlandsSecondary CellsTranscriptomic AnalysisRNA ExtractionCell Sorting

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