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Visualización de la proteína quinasa Una actividad en ratones de trabajo fijos en la cabeza utilizando la microscopía de imágenes de por vida con fluorescencia de dos fotones in Vivo
JoVE Journal
Neuroscience
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JoVE Journal Neuroscience
Visualizing Protein Kinase A Activity In Head-fixed Behaving Mice Using In Vivo Two-photon Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy
DOI:

10:41 min

June 07, 2019

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Chapters

  • 00:04Title
  • 01:06Motorized Treadmill Construction
  • 03:22In Vivo Two-photon Fluorescence Lifetime Imaging (2pFLIM) Microscopy
  • 06:292pFLIM Image Analysis
  • 08:38Results: Representative 2pFLIM Data Quantification and Targeted A-Kinase Activity-reporter-alpha (t-AKAR-alpha) Tracking
  • 09:29Conclusion

Summary

Automatic Translation

Se presenta un procedimiento para visualizar las actividades de proteína quinasa A en ratones que se fijan en la cabeza y se comportan. Un reportero mejorado de actividad de A-quinasa, tAKAR, se expresa en las neuronas corticales y se hace accesible para la toma de imágenes a través de una ventana craneal. La microscopía por imágenes de por vida de fluorescencia de dos fotones se utiliza para visualizar las actividades de PKA in vivo durante la locomoción forzada.

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