/
/
-Voor-stapmodus zuivering van macromoleculaire complexen met behulp van RNA gekoppeld aan biotine en een foto-cleavable Linker
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:04Title
- 00:51Substrate Preparation
- 01:28Complex Assembly
- 02:14Immobilization of the RNA/protein Complexes on Streptavidin Beads
- 04:00UV-Elution
- 05:08Sample Analysis by Silver Staining Followed by Mass Spectrometry
- 05:59Results: Analysis of UV-eluted Complexes
- 07:36Conclusion
RNA/eiwitcomplexen gezuiverd met behulp van botin-streptavidine strategie worden geëlueerd oplossing onder denatureren voorwaarden in een vorm die ongeschikt zijn voor verdere zuivering en de functionaalanalyse. Hier beschrijven we een wijziging van deze strategie dat gebruik maakt van een foto-cleavable linker in RNA en een zachte UV-elutie stap, inheemse en volledig functionele RNA/eiwitcomplexen oplevert.
