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Combinando reticulação química e espectrometria de massa de complexos de proteínas intactas para estudar a arquitetura de montagens de proteínas com multi- subunidades
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Combining Chemical Cross-linking and Mass Spectrometry of Intact Protein Complexes to Study the Architecture of Multi-subunit Protein Assemblies

Combinando reticulação química e espectrometria de massa de complexos de proteínas intactas para estudar a arquitetura de montagens de proteínas com multi- subunidades

português

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November 28, 2017

DOI:

10.3791/56747-v

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10.3791/56747-v

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November 28, 2017

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1Interdisciplinary research center HALOmem,Martin Luther University Halle-Wittenberg, 2Department of Chemistry,Kings College London

Summary

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A arquitetura de complexos de proteínas é essencial para a sua função. Combinar várias técnicas de espectrometria de massa provou poderosa para estudar seu assembly. Nós fornecemos protocolos para cross-linking química e espectrometria de massa nativa e mostrar como essas técnicas complementares ajudam a elucidar a arquitetura de assemblies multi o subunit da proteína.

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Chemical Cross-linkingMass SpectrometryIntact Protein ComplexesMulti-subunit Protein AssembliesStructural InformationCompositionConnectivityStoichiometryProtein Complex PurificationElectrophoresisCoomassie StainingProtein Band ExcisionDisulfide ReductionCysteine AlkylationTrypsin DigestionPeptide Extraction

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Haupt, C., Hofmann, T., Wittig, S., Kostmann, S., Politis, A., Schmidt, C. Combining Chemical Cross-linking and Mass Spectrometry of Intact Protein Complexes to Study the Architecture of Multi-subunit Protein Assemblies. J. Vis. Exp. (129), e56747, doi:10.3791/56747 (2017).

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