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Desenvolvimento de ensaio para quantificação de conteúdo elevado de Sod1 proteína mutante formação agregada em células vivas
JoVE Journal
Neuroscience
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JoVE Journal Neuroscience
Assay Development for High Content Quantification of Sod1 Mutant Protein Aggregate Formation in Living Cells
DOI:

11:12 min

October 04, 2017

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Chapters

  • 00:05Title
  • 00:58Lentivirus Production
  • 02:50Lentiviral Transduction and Stable Line Generation
  • 04:53Dose Response Effect of Proteosome Inhibitors on Protein Aggregation and Image Analysis
  • 07:06Time lapse Imaging of YFP Expression in Living Cells
  • 08:09Results: Quantification of SOD1 Mutant Protein Aggregate Formation
  • 10:04Conclusion

Summary

Automatic Translation

Nós descrevemos um método para quantificar a agregação de misfolded proteínas. Nossos detalhes de protocolo Lentivirus induzida por geração de linha celular estável, imagem latente confocal automatizada e análise de imagens de agregados de proteínas. Como uma aplicação ilustrativa, estudamos o efeito de pequenas moléculas na promoção da SOD1 agregação de maneira tempo e dose-dependente.

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