Structure-function Studies in Mouse Embryonic Stem Cells Using Recombinase-mediated Cassette Exchange

Tim Pieters; Lieven Haenebalcke; Kenneth Bruneel; Niels Vandamme; Tino Hochepied; Jolanda van Hengel; Dagmar Wirth; Geert Berx; Jody J. Haigh; Frans van Roy; Steven Goossens

doi:10.3791/55575

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Estudos de estrutura e função em células-tronco embrionárias de camundongos usando troca de cassete mediada por recombinase

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Developmental Biology

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Structure-function Studies in Mouse Embryonic Stem Cells Using Recombinase-mediated Cassette Exchange

Estudos de estrutura e função em células-tronco embrionárias de camundongos usando troca de cassete mediada por recombinase

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15:13 min

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April 27, 2017

DOI:

10.3791/55575-v

DOI:

10.3791/55575-v

•

15:13 min

April 27, 2017

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Tim Pieters^1,2,3,4, Lieven Haenebalcke^1,2, Kenneth Bruneel^1,2,4, Niels Vandamme^1,2,4, Tino Hochepied^1,2, Jolanda van Hengel⁵, Dagmar Wirth⁶, Geert Berx^1,2,4, Jody J. Haigh⁷, Frans van Roy^1,2,4, Steven Goossens^1,2,3,4

¹Department of Biomedical Molecular Biology,Ghent University, ²Inflammation Research Center,VIB, ³Center for Medical Genetics,Ghent University Hospital, ⁴Cancer Research Institute Ghent (CRIG), ⁵Department of Basic Medical Sciences, Faculty of Medicine and Health Sciences,Ghent University, ⁶Helmholtz Center for Infection Research, ⁷Mammalian Functional Genetics Laboratory, Division of Blood Cancers, Australian Centre for Blood Diseases, Department of Clinical Haematology,Monash University and Alfred Health Alfred Centre

Summary

Proteínas, muitas vezes contêm vários domínios que podem exercer diferentes funções celulares. Gene knock-out (KO) não consideram essa diversidade funcional. Aqui, relatamos uma abordagem de estrutura-função com base na troca de cassete mediada por recombinação (RMCE) em KO células estaminais embrionárias que permite a dissecação molecular de vários domínios funcionais ou variantes de uma proteína.

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Structure-function Mouse Embryonic Stem Cells Recombinase-mediated Cassette Exchange RMCE Genome Targeting Knock-out Rescue Constructs Cell Differentiation Molecular Biology Biotechnology

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