JoVE Science Education
Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Science Education Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
Bacterial Transformation: The Heat Shock Method
  • 00:00Overview
  • 00:50Basic Principles of Heat Shock Transformation
  • 03:34The Heat Shock Reaction
  • 06:26Preparing Competent Cells
  • 08:38Applications
  • 10:36Summary

טרנספורמציה חיידקית: שיטת הלם החום

English

Share

Overview

טרנספורמציה היא התהליך המתרחש כאשר תא בולע דנ”א זר מסביבתו. טרנספורמציה יכולה להתרחש בטבע בסוגים מסוימים של חיידקים. בביולוגיה מולקולרית, טרנספורמציה משוחזרת באופן מלאכותי במעבדה באמצעות יצירת נקבוביות בקרומי תאים חיידקיים. תאים חיידקיים המסוגלים לקלוט דנ”א מהסביבה נקראים תאים מוסמכים. במעבדה, תאים חיידקיים יכולים להיות מוכשרים ו- DNA לאחר מכן הציג על ידי הליך שנקרא שיטת הלם חום.

שינוי הלם חום משתמש בסביבה עשירה בסידן המסופקת על ידי סידן כלוריד כדי לנטרל את הדחייה האלקטרוסטטית בין ה- DNA plasmid לבין הממברנה התאית החיידקית. עלייה פתאומית בטמפרטורה יוצרת נקבוביות בקרום הפלזמה של החיידקים ומאפשרת לדנ”א פלסמיד להיכנס לתא החיידקי. וידאו זה עובר הליך שלב אחר שלב על איך ליצור חיידקים מוכשרים מבחינה כימית, לבצע טרנספורמציה הלם חום, צלחת החיידקים שעברו טרנספורמציה, ולחשב יעילות טרנספורמציה.

Procedure

טרנספורמציה חיידקית היא שיטה נפוצה שבה דנ”א זר נכנס לחיידק, אשר לאחר מכן יכול להגביר, או לשכפל את ה- DNA. תאים שיש להם את היכולת לקחת בקלות את ה- DNA הזה נקראים תאים מוסמכים. למרות שהשינוי מתרחש באופן טבעי בסוגים רבים של חיידקים, מדענים מצאו דרכים לגרום באופן מלאכותי ולשפר את כשירותו של תא חיידק…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

Transcript

Tags

Cite This
JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Bacterial Transformation: The Heat Shock Method. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

Related Videos