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Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
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JoVE Science Education Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
Bacterial Transformation: The Heat Shock Method
  • 00:00Overview
  • 00:50Basic Principles of Heat Shock Transformation
  • 03:34The Heat Shock Reaction
  • 06:26Preparing Competent Cells
  • 08:38Applications
  • 10:36Summary

细菌转化:热激法

English

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Overview

转化是指细菌从外部环境摄入外源DNA的过程。自然界中,某些类型的细菌可以发生转化。而在分子生物学中,可通过在细菌细胞壁上穿孔来人工诱导转化。能够从环境中接受DNA的细菌细胞被称为感受态细胞。可在实验室制备感受态细胞,随后通过一种叫热激法的技术来转入DNA。

热激转化利用氯化钙来产生富含钙离子的环境,从而抵消质粒DNA和细菌细胞膜之间的静电排斥。温度的急剧提高可以在细菌胞膜表面形成小孔,质粒DNA就可进入细菌细胞。本短片逐步介绍了如何制备化学感受态细菌。如何进行热激转化,涂板转化的细菌,以及计算转化效率。

Procedure

细菌转化是一种应用广泛的方法,它将外源DNA导入细菌,用以扩增或者克隆DNA。能够摄入外源DNA的细胞被称为感受态细胞。尽管自然界中许多类型的细菌可发生转化,科学家们已经找到方法来人工诱导和增强细菌细胞的感受性。本 短片中,我们将讲述这些方法中的一个:热激转化。 在介绍热激转化技术之前,让我们先讨论一下在细菌转化中最常用的DNA类型:质粒。质粒?…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Bacterial Transformation: The Heat Shock Method. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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