Encyclopedia of Experiments: Cancer Research
需要订阅 JoVE 才能查看此 内容. 登录或开始免费试用。
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
Для начала поместите анестезированной мыши на хирургическую кровать и ввести бупренорфин, анальгетики, чтобы облегчить боль, подкожно в плечо. Затем вставьте нос мыши в маску для носа, чтобы обеспечить непрерывный запас кислорода и анестезии, таких как изофлюран животному. Используя лабораторную ленту, обездвижить конечности и стерилизовать кожу грудной клетки хлоргексидином и йодом, двумя дезинфицирующими средствами и этанолом.
Теперь используйте ножницы, чтобы сделать разрез в середине передней стенки грудной клетки и инвертировать кожу с типсами, чтобы разоблачить белый молочный жир площадку. Тщательно ввисьйте подвеску раковых клеток, выражают биолюминесцентный белок, в молочную жировую площадку. Подождите 5 секунд, прежде чем вытащить иглу, чтобы предотвратить обратное поток. Аккуратно отпустите жировую прокладку и используйте стерильные швы, чтобы сшить и закрыть разрез.
Инъекционные раковые клетки внутри молочной жировой площадки быстро делятся, чтобы сформировать опухоль. Вернуть животное в клетку после процедуры. Внимательно следите за животным до тех пор, пока оно не оправиться от анестезии и не начнет свободно передвигаться.
В следующем протоколе, мы имплантируем клетки аденокарциномы молочной железы, выражают люциферазу в молочную жировую площадку взрослой мыши.
Начните с подтверждения отсутствия реакции на щепотку ноша в анестезизированных самок мыши и лентой конечностей животного на хирургическую доску. Используя стерильные ватные тампоны, стерилизовать хирургическую область хлоргексидином, йодом и этанолом 75%, а также сделать пятимиллиметровый разрез кожи в середине передней стенки грудной клетки. Затем поднимите правую сторону кожи, прилегающую к разрезу, и используйте стерильные ножницы микропересмешки, чтобы отделить кожу от грудной стенки.
Инвертировать кожу, чтобы разоблачить право номер два молочных жира площадку и использовать один миллилитр инсулина шприц оснащен 28,5 калибровочных иглы тщательно вводить 20 микролитров подвески раковых клеток через рану в жировой прокладке. Держите иглу в жировой прокладке в течение пяти секунд, чтобы желатиновая смесь белка раковых клеток затвердеть перед удалением иглы, и закрытие разреза стерильными 5-0 неаспасаемых швов. Затем поместите животное в чистую клетку с мониторингом до полного лежачих.