ऑर्थोटोपिक इंजेक्शन: ऊतक विशिष्ट कैंसर कोशिकाओं को वयस्क माउस में प्रत्यारोपित करना

शुरू करने के लिए, एक शल्य चिकित्सा बिस्तर पर एक एनेस्थेटाइज्ड माउस रखें और दर्द को दूर करने के लिए एक एनाल्जेसिक, बुप्रेनोरफिन इंजेक्ट करें, कंधे में चमड़े के साथ। इसके बाद, माउस नाक को नाक के मुखौटे में डालें ताकि ऑक्सीजन और एनेस्थेटिक की निरंतर आपूर्ति प्रदान की जा सके, जैसे कि जानवर को आइसोफ्लुनाणे। कुछ प्रयोगशाला टेप का उपयोग करके, अंगों को स्थिर करें और क्लोरहेक्सीडीन और आयोडीन, दो कीटाणुनाशक और इथेनॉल के साथ छाती की त्वचा को निष्फल करें।

अब कैंची का उपयोग पूर्वकाल छाती की दीवार के बीच में एक चीरा बनाने के लिए और सफेद स्तन वसा पैड का पर्दाफाश करने के लिए संदंश के साथ त्वचा उलटा । ध्यान से कैंसर सेल निलंबन मैमेरी फैट पैड में एक बायोल्यूमिनेसेंट प्रोटीन व्यक्त इंजेक्ट। बैकफ्लो को रोकने के लिए सुई को खींचने से पहले 5 सेकंड तक प्रतीक्षा करें। धीरे से वसा पैड जारी करें और सिलाई और चीरा बंद करने के लिए बाँझ टांके का उपयोग करें।

स्तन वसा पैड के अंदर इंजेक्शन कैंसर कोशिकाओं को तेजी से एक ट्यूमर बनाने के लिए विभाजित । प्रक्रिया के बाद जानवर को पिंजरे में लौटाएं। जानवर की बारीकी से निगरानी करें जब तक कि यह संज्ञाहरण से ठीक न हो जाए और स्वतंत्र रूप से आगे बढ़ना शुरू न हो जाए।

निम्नलिखित प्रोटोकॉल में, हम एक वयस्क माउस के स्तन वसा पैड में लूसिफ़ेरेस व्यक्त करते हुए मैमेरी एडेनोकार्सिनोमा कोशिकाओं को प्रत्यारोपित करेंगे।

एक एनेस्थेटाइज्ड मादा माउस में पैर की अंगुली चुटकी के लिए प्रतिक्रिया की कमी की पुष्टि करके शुरू करें और एक सर्जिकल बोर्ड को जानवर के अंगों को टेप करें। बाँझ कपास झाड़ू का उपयोग करना, क्लोरहेक्सीडीन, आयोडीन, और 75% इथेनॉल के साथ सर्जिकल क्षेत्र को बाँझ, और पूर्वकाल छाती की दीवार के बीच में पांच मिलीमीटर त्वचा चीरा बनाते हैं। इसके बाद, चीरा के निकट त्वचा के दाईं ओर उठाएं और छाती की दीवार से त्वचा को अलग करने के लिए बाँझ माइक्रोडिसेक्शन कैंची का उपयोग करें।

त्वचा को उलटा सही नंबर दो स्तन वसा पैड का पर्दाफाश करने के लिए और एक मिलीलीटर इंसुलिन सिरिंज का उपयोग करें जो 28.5 गेज सुई से लैस है ताकि घाव के माध्यम से कैंसर सेल निलंबन के 20 माइक्रोलीटर को वसा पैड में सावधानी से इंजेक्ट किया जा सके। सुई को हटाने से पहले जिलेटिन कैंसर सेल प्रोटीन मिश्रण को जमना और बाँझ 5-0 गैर-अवशोषित टांके के साथ चीरा बंद करने की अनुमति देने के लिए पांच सेकंड के लिए वसा पैड के भीतर सुई पकड़ो। फिर, पूर्ण भार शक्ति तक निगरानी के साथ एक साफ पिंजरे में जानवर रखें।