Dergi
/
/
التعديل الكيميائي لبقايا التربتوفان في Ca2+-ATPase N-domain لدراسة تريبتوفان-ANS FRET
JoVE Journal
Biyokimya
Author Produced
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir.  Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.
JoVE Journal Biyokimya
Chemical Modification of the Tryptophan Residue in a Recombinant Ca2+-ATPase N-domain for Studying Tryptophan-ANS FRET

التعديل الكيميائي لبقايا التربتوفان في Ca2+-ATPase N-domain لدراسة تريبتوفان-ANS FRET

DOI:

12:07 min

October 09, 2021

,

Bölümler

  • 00:03Introduction
  • 01:15Determination (in silico) of the ANS and SERCA N‐Domain Interaction
  • 03:09Expression and Purification of the Recombinant N‐Domain
  • 03:39Monitor the Formation of the ANS‐N‐Domain Complex Based on ANS and N‐Domain Fluorescence Intensity Changes
  • 07:38N‐Domain Intrinsic Fluorescence Titration by Trp Chemical Modification with NBS
  • 08:43Titrate the NBS Modified N‐Domain with ANS by Recording Fluorescence Spectra at 25°C
  • 09:37Evidence of ANS Binding to the Chemically Modified N‐Domain by Excitation at λ = 370 nm
  • 10:32Results Overview
  • 11:30Conclusions

Özet

Otomatik Çeviri

ANS يربط Ca2 +-ATPase recombinant N-المجال. عرض أطياف مضان نمط مثل FRET عند الإثارة في الطول الموجي من 295 نانومتر. ويروي التعديل الكيميائي الذي يتوسط فيه المكتب الوطني للإحصاء في Trp مضان المجال N، مما يؤدي إلى عدم وجود نقل للطاقة (FRET) بين بقايا Trp و ANS.

İlgili Videolar

Read Article