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진핵 세포에서 번역 단지의 신속한 생체 내 고정 및 격리
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Rapid In Vivo Fixation and Isolation of Translational Complexes from Eukaryotic Cells
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진핵 세포에서 번역 단지의 신속한 생체 내 고정 및 격리

DOI:
10.3791/62639-v

•

14:29 min

•

December 25, 2021

•

, , , , ,
1Division of Genome Sciences and Cancer, The John Curtin School of Medical Research,The Australian National University, 2Centre for Advanced Microscopy,The Australian National University, 3Victor Chang Cardiac Research Institute

Bölümler

  • 00:10Introduction
  • 01:06Yeast Cell Culture and FIxation
  • 03:58Yeast Cell Disruption and Cytosol Collection
  • 05:45Mammalian Cell Culture and Fixation
  • 09:40Mammalian Cell Disruption and Cytosol Collection
  • 11:02Sonuçlar
  • 13:41Conclusion

Özet

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우리는 살아있는 효모와 포유류 세포에서 포름알데히드가 교차하는 번역 (단백질 생합성) 복합체를 급속하게 안정화시키는 기술을 제시합니다. 접근은 과도 중간및 동적 RNA:단백질 상호 작용을 해부할 수 있습니다. 교차 연결된 복합체는 심층 시퀀싱 기반 프로파일링 방법, 현미경 검사법 및 질량 분석법과 같은 여러 다운스트림 응용 분야에서 사용할 수 있습니다.

Etiketler

In Vivo FixationTranslational ComplexesEukaryotic CellsRapid ChillingFormaldehyde FixationGlycine QuenchingCell LysisRibosomal FractionsAffinity PurificationRNA AnalysisMass SpectrometryYeast CultureExponential Growth PhaseFormaldehyde ConcentrationFixation TimeCell PelletingGlycine Buffer

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