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真核細胞からのトランスレーショナル複合体の迅速な インビボ 固定と分離
JoVE Journal
Biyoloji
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JoVE Journal Biyoloji
Rapid In Vivo Fixation and Isolation of Translational Complexes from Eukaryotic Cells

真核細胞からのトランスレーショナル複合体の迅速な インビボ 固定と分離

DOI:

14:29 min

December 25, 2021

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Bölümler

  • 00:10Introduction
  • 01:06Yeast Cell Culture and FIxation
  • 03:58Yeast Cell Disruption and Cytosol Collection
  • 05:45Mammalian Cell Culture and Fixation
  • 09:40Mammalian Cell Disruption and Cytosol Collection
  • 11:02Sonuçlar
  • 13:41Conclusion

Özet

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生きた酵母や哺乳動物細胞におけるホルムアルデヒド架橋を用いた翻訳(タンパク質生合成)複合体を迅速に安定化させる技術を紹介する。このアプローチにより、一過性の中間体と動的RNA:タンパク質相互作用の解剖が可能になります。架橋された複合体は、深いシーケンシングベースのプロファイリング方法、顕微鏡、質量分析など、複数のダウンストリームアプリケーションで使用できます。

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