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Uso dell'elemento Alu contenente Minigenes per analizzare gli RNA circolari
JoVE Journal
Biyokimya
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JoVE Journal Biyokimya
Use of Alu Element Containing Minigenes to Analyze Circular RNAs

Uso dell'elemento Alu contenente Minigenes per analizzare gli RNA circolari

DOI:

13:10 min

March 10, 2020

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Bölümler

  • 00:05Introduction
  • 01:09Design of the Constructs
  • 02:14Select the Sequence to be Cloned in an Expression Vector
  • 03:35Design Primers for Cloning
  • 04:59Cloning of Constructs
  • 07:05Transfection of the Reporter Genes into Eukaryotic Cells
  • 10:21Results: Analysis of Circular RNAs
  • 11:09Conclusion

Özet

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Cloniamo e analizziamo i geni dei reporter generando RNA circolari. Questi geni reporter sono più grandi dei costrutti per analizzare lo splicing lineare e contenere elementi Alu. Per studiare gli RNA circolari, i costrutti vengono trasfettati in cellule e l'RNA risultante viene analizzato utilizzando RT-PCR dopo la rimozione dell'RNA lineare.

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