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Medición directa del compromiso objetivo de KDM1A mediante inmunoensayos basados en chemoprobe
JoVE Journal
Biyokimya
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JoVE Journal Biyokimya
Direct Measurement of KDM1A Target Engagement Using Chemoprobe-based Immunoassays

Medición directa del compromiso objetivo de KDM1A mediante inmunoensayos basados en chemoprobe

DOI:

11:17 min

June 13, 2019

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Bölümler

  • 00:04Başlık
  • 01:05Solution Preparation
  • 02:11Native Protein Extraction
  • 03:51Luminescent ELISAs for Total and Free KDM1A Determination
  • 08:42Results: Direct Measurement of KDM1A Target Engagement
  • 10:32Conclusion

Özet

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Aquí, presentamos un protocolo para medir el compromiso objetivo de KDM1A en una célula humana o animal, muestras de tejido o sangre tratadas con inhibidores de KDM1A. El protocolo emplea el etiquetado quimioprobe de la enzima KDM1A libre y la cuantificación directa de la ocupación objetivo mediante inmunoensayos basados en quimiosondas y se puede utilizar en estudios preclínicos y clínicos.

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